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cg技術(shù)論文范文第1篇

1.1農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長內(nèi)生性影響因素的理論分析下面從理論角度分析內(nèi)生性影響因素對農(nóng)業(yè)經(jīng)濟發(fā)展的影響機制：

（1）物質(zhì)資本和土地。資本常指在生產(chǎn)過程中涉及到的各種生產(chǎn)資料，包括生產(chǎn)場所、勞動工具等，對于農(nóng)業(yè)經(jīng)濟發(fā)展，農(nóng)業(yè)資本指為進行農(nóng)業(yè)生產(chǎn)所投入的各種生產(chǎn)資料的總和，包括用種量、農(nóng)藥和化肥等。顯然，農(nóng)藥化肥和其他各類農(nóng)資產(chǎn)品的使用對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)至關(guān)重要。作為一種特殊的物質(zhì)資本形式，土地在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中的作用尤為顯著。一般而言，隨著農(nóng)業(yè)機械化的發(fā)展和農(nóng)業(yè)基礎(chǔ)設(shè)施的改善，勞動力擁有的農(nóng)業(yè)機器設(shè)備越多，土地面積越廣闊，勞動生產(chǎn)率提高得越快。

（2）人力資本。人力資本對農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長具有非常重要的作用。人力資本理論認(rèn)為，勞動投入應(yīng)當(dāng)是“勞動力數(shù)量”與“勞動力素質(zhì)”的綜合反映。勞動力素質(zhì)往往與勞動力接受的教育程度和與職業(yè)相關(guān)的培訓(xùn)程度有關(guān)。勞動的不斷積累會使得勞動本身產(chǎn)生遞增收益；勞動質(zhì)量的提高會使得勞動以外的因素如資本等產(chǎn)生遞增收益，提高生產(chǎn)效率，增加其他生產(chǎn)要素的邊際產(chǎn)出，同時會使得它們的單位成本下降。

（3）技術(shù)進步?？茖W(xué)技術(shù)是第一生產(chǎn)力，科技的發(fā)展對農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長起著推動作用。技術(shù)進步從三個方面影響農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長：第一，技術(shù)進步有利于促進農(nóng)業(yè)經(jīng)濟發(fā)展從傳統(tǒng)的“粗放式”轉(zhuǎn)變?yōu)楝F(xiàn)代的“集約式”；第二，在市場競爭中，技術(shù)可以幫助企業(yè)實現(xiàn)集約化經(jīng)營，提高競爭力；第三，技術(shù)進步對經(jīng)濟增長具有乘數(shù)效應(yīng)，技術(shù)進步能夠促使產(chǎn)業(yè)內(nèi)部生產(chǎn)要素優(yōu)化配置，促使生產(chǎn)要素在不同產(chǎn)業(yè)之間不斷流動，從而實現(xiàn)跨產(chǎn)業(yè)的技術(shù)要素融合，改變產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)。

1.2數(shù)據(jù)來源與變量選擇本文實證分析的數(shù)據(jù)來源于1996-2013年的《湖北統(tǒng)計年鑒》和《中國農(nóng)村統(tǒng)計年鑒》。具體地，每個變量采用的指標(biāo)及個別變量的近似替代詳述如下：

（1）農(nóng)業(yè)經(jīng)濟總產(chǎn)出（Y）：用“農(nóng)林牧漁業(yè)總產(chǎn)值（單位：億元，當(dāng)年價格）”指標(biāo)來衡量；

（2）物質(zhì)資本變量（K）：現(xiàn)有文獻對于“物質(zhì)資本”的度量主要有兩種方法：一種是以“物質(zhì)費用”近似替代，另一種是用“固定資產(chǎn)”近似替代。本文認(rèn)為以“物質(zhì)費用”近似替代農(nóng)業(yè)資本更符合生產(chǎn)的實際情況，所以本文釆用“農(nóng)業(yè)物質(zhì)費用”這一指標(biāo)衡量農(nóng)業(yè)物質(zhì)資本投入，選取“農(nóng)林牧漁業(yè)中間消耗（單位：億元）”指標(biāo)表示。根據(jù)現(xiàn)有文獻的研究結(jié)果及生產(chǎn)實際，預(yù)計物質(zhì)資本投入與農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長正相關(guān)；

（3）土地變量（M）：用“當(dāng)年農(nóng)作物總播種面積（單位：萬畝）”指標(biāo)來衡量。隨著湖北省城鎮(zhèn)化建設(shè)進程的不斷加快，農(nóng)業(yè)用地勢必會受到一定程度的影響；同時，農(nóng)用土地幾乎沒有大幅增加的可能，所以土地對農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長的影響有待通過進一步的定量分析來解決；

（4）勞動變量（L）：人力資本理論認(rèn)為，勞動投入應(yīng)當(dāng)是“勞動力數(shù)量”與“勞動力素質(zhì)”的綜合反映。本文釆用“教育存量法”對人力資本存量加以計量，由于無法獲取農(nóng)業(yè)部門勞動力受教育程度數(shù)據(jù)，所以本文采取近似替代的處理方法。根據(jù)鄉(xiāng)村從業(yè)總?cè)藬?shù)（單位：萬人，來源《湖北統(tǒng)計年鑒》）及平均每百個勞動力文化狀況比（來源《中國農(nóng)村統(tǒng)計年鑒》），加權(quán)加總得出人力資本總存量。其中“，平均每百個勞動力文化狀況比”將文化程度區(qū)分為文盲或半文盲、小學(xué)程度、初中程度、高中程度、中專程度、大專以上，本文根據(jù)每種受教育情況對應(yīng)的實際受教育年限，對其分別賦值為0、6、9、12、12、16。綜合國內(nèi)外研究現(xiàn)狀發(fā)現(xiàn)，農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長中存在著“人力資本陷阱”，結(jié)合湖北農(nóng)村勞動力實際狀況，因此人力資本變量對農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長的影響有待進一步證實。

（5）技術(shù)進步變量（T）：本文用序數(shù)變量來反映技術(shù)進步的變化趨勢，即1995年T值為1，按年份依次遞增，2012年T值為18。農(nóng)業(yè)經(jīng)濟會隨著農(nóng)業(yè)技術(shù)水平的提高而逐漸增長。

2擴展的Cobb-Douglas函數(shù)

Cobb-Douglas生產(chǎn)函數(shù)常用于分析經(jīng)濟生產(chǎn)系統(tǒng)中投入與產(chǎn)出的數(shù)量關(guān)系，是一種應(yīng)用較為廣泛的生產(chǎn)函數(shù)形式，近年來被大量應(yīng)用于農(nóng)業(yè)經(jīng)濟研究領(lǐng)域。Cobb-Douglas函數(shù)的基本形式為，其中，Y表示產(chǎn)出量；A表示技術(shù)水平；K表示資本投入量；L表示勞動投入量；分別表示資本、勞動投入的生產(chǎn)彈性值。結(jié)合湖北省農(nóng)業(yè)經(jīng)濟的實際發(fā)展特點，本文設(shè)定農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長方程為擴展的Cobb-Douglas函數(shù)，即（1）其中，Y表示農(nóng)業(yè)總產(chǎn)出，A表示技術(shù)水平，K表示物質(zhì)資本因素，M表示土地因素，L表示人力資本因素，T表示技術(shù)變化趨勢，為隨機擾動項。為了將農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長方程作線性化處理，對模型（1）兩邊取對數(shù)得分別度量各種影響因素對農(nóng)業(yè)總產(chǎn)出的影響大小，下面通過實證分析估計參數(shù)并給出合適的經(jīng)濟學(xué)解釋。

3實證結(jié)果與分析

根據(jù)第二部分選取的變量指標(biāo)與收集的數(shù)據(jù)以及第三部分對模型的設(shè)定，利用Stata/MP13.1軟件對模型進行測算。繪制各變量的趨勢變化如圖1所示，可見，隨著年份的推移，lnM、lnL變動幅度很小，呈現(xiàn)相對穩(wěn)定的趨勢；lnY、lnK都隨著時間的增長而逐漸上升，并呈現(xiàn)“一致增長”的趨勢。畫出各解釋變量lnK、lnM、lnL相對于lnY的散點圖如圖2-圖4所示。圖2中，lnY與lnK高度正相關(guān)，lnY隨lnK幾乎呈“直線趨勢”變動；圖3中，lnY隨lnM變動的波動幅度較大，但從整體變化趨勢仍可以看出，lnY隨lnM的逐漸增加而增長，呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系；圖4中，lnY隨lnL變動的波動幅度較大，變化率隨著時間的推移逐漸遞增。做出各變量的1階差分趨勢圖如圖5所示，2階差分趨勢圖。由圖可知，各變量的1階差分序列呈現(xiàn)不平穩(wěn)序列趨勢,但它們的2階差分序列都表現(xiàn)為平穩(wěn)序列趨勢。各變量的ADF檢驗結(jié)果見表1所示，由表1可知,變量lnY、lnK、lnM、lnL的水平序列與一階差分序列都非平穩(wěn)，二階差分序列是平穩(wěn)的。因此,該序列是2階單整序列。用OLS法對模型進行協(xié)整回歸，得農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長方程為：根據(jù)協(xié)整回歸的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各變量的系數(shù)符號基本與預(yù)期相符，lnK的系數(shù)在0.1%的水平上顯著，lnL的系數(shù)在1%的水平上顯著；，模型具有良好的擬合優(yōu)度，并且，說明各解釋變量的變化能很好地解釋農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長的變化。作出該回歸的殘差圖，從殘差圖中可以看出殘差值較為平穩(wěn)，模型的擬合的效果較好。

為進一步驗證水平序列l(wèi)nY、lnK、lnM、lnL之間是否存在著確定的協(xié)整關(guān)系，對殘差序列進行ADF檢驗。殘差項的DF統(tǒng)計量值為-6.717<-2.66（01%顯著性水平下的臨界值），故可以在1%的水平上拒絕“殘差項存在單位根”的原假設(shè)，所以，殘差序列為平穩(wěn)序列，即回歸變量之間存在著唯一的協(xié)整關(guān)系。根據(jù)回歸結(jié)果可知，lnK的系數(shù)為1.012且顯著，對農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長作用明顯，說明物質(zhì)資本每增加1%，農(nóng)業(yè)總產(chǎn)出會隨之增加1.012%，隨著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中物質(zhì)消耗的增多，農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長較快，且增長幅度更大，這比較符合傳統(tǒng)的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟發(fā)展模式，表明湖北的農(nóng)業(yè)發(fā)展還處于傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)階段；lnM的系數(shù)為0.104但不顯著，說明研究期間農(nóng)作物總播種面積對農(nóng)業(yè)經(jīng)濟的變化沒有顯著影響，可能是因為農(nóng)業(yè)經(jīng)濟發(fā)展從土地要素獲得的動力已經(jīng)十分微弱，與傳統(tǒng)的農(nóng)業(yè)發(fā)展模式相比，現(xiàn)代農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長更多地依賴于農(nóng)業(yè)技術(shù)的應(yīng)用；lnL的系數(shù)為-1.168且顯著，對農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長作用明顯，說明人力資本每增加1%，農(nóng)業(yè)總產(chǎn)出會隨之減少1.168%；說明隨著農(nóng)村人力資本存量的增加，農(nóng)業(yè)經(jīng)濟不增反降。這很可能與湖北省的農(nóng)村地區(qū)勞動力過?；蛴捎谵r(nóng)業(yè)技術(shù)培訓(xùn)不足等導(dǎo)致的農(nóng)民素質(zhì)過低有關(guān)，過剩的勞動力不能及時有序地從農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)移到二、三產(chǎn)業(yè)，這反而給農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長造成了負(fù)擔(dān)，農(nóng)業(yè)經(jīng)濟發(fā)展效率低下，從而產(chǎn)生抑制效應(yīng)；T（技術(shù)變化趨勢）的系數(shù)為0.00578但不顯著，系數(shù)符號符合理論分析的預(yù)期，不過，由于本文限于數(shù)據(jù)的可得性，對于技術(shù)變化趨勢的處理不太精確，其顯著性有待進一步驗證。

4結(jié)論與對策建議

本文基于湖北省農(nóng)業(yè)經(jīng)濟發(fā)展的實際情況，通過構(gòu)建農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長模型——擴展的Cobb-Douglas函數(shù)實證研究了農(nóng)業(yè)經(jīng)濟內(nèi)生性因素投入對總產(chǎn)出的影響。實證分析基于1996-2013年的《湖北統(tǒng)計年鑒》和《中國農(nóng)村統(tǒng)計年鑒》的年度數(shù)據(jù)，測算了物質(zhì)資本、土地面積、勞動力投入、技術(shù)進步四個內(nèi)生性因素對農(nóng)業(yè)經(jīng)濟總產(chǎn)出的效應(yīng)。具體結(jié)論如下：

（1）物質(zhì)資本投入對農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長具有顯著的正效應(yīng)，隨著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中物質(zhì)消耗的增多，農(nóng)業(yè)經(jīng)濟增長較快，且增長幅度更大，這比較符合傳統(tǒng)的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟發(fā)展模式，表明湖北的農(nóng)業(yè)發(fā)展還處于傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)階段；

cg技術(shù)論文范文第2篇

關(guān)鍵詞：手繪動畫 新媒體 藝術(shù)語言

當(dāng)前，新媒體技術(shù)正在改變著社會，改變著現(xiàn)代人的生活觀念、生活方式以及生活節(jié)奏，人們的生活正在隨著網(wǎng)絡(luò)、計算機的普及應(yīng)用發(fā)生著翻天覆地的變化。而由于新媒體技術(shù)本身的特質(zhì)，這種改變不再是如工業(yè)革命一樣是單一方向的，而是多元的，互動的改變，各種審美趣味――娛樂的、低俗的、有品位的、富有情感的都交融在一起，產(chǎn)生了歷史性的交匯。詹明信教授在《晚期資本主義的文化邏輯》一書中指出：電影、電視、攝影等媒介的機械性復(fù)制以及商品化的大規(guī)模生產(chǎn)，這一切都構(gòu)筑了“仿像社會”。 也就是“虛擬世界”，人與人之間的交流互動、人對世界的感知都通過這個被模擬的虛擬世界。于是大量的娛樂性的、注重瞬間體驗的信息應(yīng)運而生，而三維動畫正是憑借其空間感強、視覺效果強烈、成本相對較低、制作周期短等特質(zhì)在這個虛擬的世界中被廣泛使用。然而在廣泛使用的同時，我們也不難發(fā)現(xiàn)三維動畫這種工業(yè)化的動畫產(chǎn)品在表現(xiàn)上越來越模式化、機械化，這不得不使人們對這一現(xiàn)象進行反思。

在新媒體時代是以比特來傳播信息的，比特沒有重量，沒有時空障礙，能夠輕易地被復(fù)制和被傳播，并且可以被無限的人使用，衡量比特的價值正是由使用人數(shù)的多少來決定。比特的復(fù)制技術(shù)帶來了藝術(shù)的民主化，這種民主化表現(xiàn)在動畫領(lǐng)域有以下幾點表現(xiàn)：

1、生產(chǎn)方式和技術(shù)復(fù)制化。動畫的制作由個人化走向集體化，三維動畫的創(chuàng)作從來都是集體合作的結(jié)果。并且這種技術(shù)復(fù)制的快速對畫面質(zhì)量沒有損失。手繪動畫的制作中重視的是突破，是超越，認(rèn)為重復(fù)、模擬無法展現(xiàn)其藝術(shù)生命力。但在新媒體時代，三維動畫像其他的工業(yè)產(chǎn)品一樣是批量生產(chǎn)出來的，技術(shù)湮滅了美感，在審美上用霸道的技術(shù)邏輯覆蓋了其藝術(shù)風(fēng)格和個性，但這種技術(shù)又使原來一小部分人把玩的藝術(shù)變成了大眾與藝術(shù)的聯(lián)系，真正可以實現(xiàn)“人人都是藝術(shù)家”。

2、審美個人化。新媒體時代是真正個人的時代，個人有豐富的選擇，個人與各種環(huán)境之間如機器也能和諧自然的配合，信息的傳遞使藝術(shù)融入人們?nèi)粘Ｉ钪?，過去涇渭分明的各種藝術(shù)之間的鴻溝逐漸被高速傳遞的“比特”填平，藝術(shù)不但向商業(yè)消費轉(zhuǎn)移，也變成視覺符號轉(zhuǎn)移到商業(yè)藝術(shù)中間，如廣告、影視、平面設(shè)計、網(wǎng)絡(luò)界面、服裝美容等等。一方面人的眼睛無時無刻不受到視覺沖擊，無需再為審美而跑博物館、美術(shù)觀這些高雅藝術(shù)的聚集地；另一方面，眼睛又無不很快厭倦而需要新的、更強烈的視覺沖擊。比特的易傳播易復(fù)制的技術(shù)特性正好符合了這種大量而淺表的視覺需要。

作為社會變革的力量，新媒體技術(shù)的發(fā)展是歷史的潮流，不可抵擋。新媒體技術(shù)是一門綜合性的學(xué)科，其促使了技術(shù)和人文科學(xué)、科學(xué)與藝術(shù)之間的差距日益縮小。其改變了人們的時空觀念，形成了虛擬時空的概念。其次，在后現(xiàn)代語境下的社會處處充斥著市場的邏輯，所有的文化都成為符合市場機制、可供消費的商品這造成“日常生活審美化”現(xiàn)象，藝術(shù)也需要融入生活也成為消費品。但這項先進的技術(shù)應(yīng)該更合理的使用，賦予美感和情感才是動畫藝術(shù)的最終目的，而手繪動畫的藝術(shù)語言有著包容性很強的藝術(shù)生命力，是隨著技術(shù)和各種藝術(shù)思潮的發(fā)展而向前的。正如美國動畫導(dǎo)演杰弗瑞?卡贊伯格所說，科技再成熟，鼠標(biāo)也永遠(yuǎn)取代不了人類手中的鉛筆，有一種神韻，是需要傳統(tǒng)的繪畫表現(xiàn)的。

進入數(shù)字化時代后，新媒體技術(shù)成為社會生產(chǎn)的主流，《數(shù)字化生存》中指出：“多媒體即是本質(zhì)上互動的媒體，隨著比特數(shù)字通用的出現(xiàn)而產(chǎn)生，同時，它與計算機成本降低、威力增大和呈爆炸式增長的局面息息相關(guān)?！毙旅襟w是指高技術(shù)化的多種媒體的融合，集圖、文、影像、聲音和互動性為一體，新媒體的運行又依賴于多種專業(yè)的軟件，如：平面軟件Adobo Photoshop、三維動畫軟件3Dmax，MAYA，特效視頻軟件Flash、AE，其既包含計算機、信息等工程技術(shù)，又包含美術(shù)、音樂、舞蹈、雕塑、建筑等藝術(shù)元素，又包含影視、網(wǎng)絡(luò)等傳播媒介，“生產(chǎn)力決定生產(chǎn)關(guān)系”， 隨著多媒體技術(shù)的飛速發(fā)展，計算機圖形CG（Computer Graphic）的概念被引入到動畫領(lǐng)域，計算機軟硬件虛構(gòu)的三維空間被廣泛的應(yīng)用，三維動畫是整合了多媒體技術(shù)并且完全依靠多媒體而出現(xiàn)的一種新的動畫形式，三維動畫與手繪動畫相比有以下優(yōu)勢：一、能夠完成實拍不能完成的鏡頭。二、可修改性強，節(jié)省成本。三、無法重現(xiàn)的鏡頭可通過三維動畫來模擬完成。四、不受幀數(shù)的限制，渲染程序可以自動產(chǎn)生足夠的畫面。三維動畫不但大幅提高了動畫的制作效率并且產(chǎn)生了新的影像美學(xué)。但由于強勢的技術(shù)覆蓋了美感，三維動畫的發(fā)展?fàn)顟B(tài)傾向于模擬現(xiàn)實，過分追求視覺上的刺激和新奇，作品被內(nèi)涵被炫目的技術(shù)掩蓋，缺少了情感，這也就背離觀眾觀看的初衷，很多作品都只是一種技術(shù)游戲。

就目前整個動畫領(lǐng)域而言，基本形成了三大類動畫的表現(xiàn)形式：三維動畫、手繪動畫（2D手繪動畫）、定格動畫。本論文認(rèn)為在三維動畫出現(xiàn)之前，并沒有手繪動畫的觀念，手繪動畫是相對于三維動畫而言的。三維動畫的出現(xiàn)使傳統(tǒng)的動畫成為了手繪動畫，指在平面中繪制的動畫。

一方面多媒體技術(shù)自身在不斷更新技術(shù)，多媒體的發(fā)展也給手繪動畫帶來使用媒介上的拓展，目前有專門的軟件如Adobo Photoshop、Painter模擬油畫、水彩等繪畫效果，而電子筆也可以對屏幕進行手寫式的輸入，這些硬件設(shè)施的開發(fā)趨勢實際上是為手繪動畫實現(xiàn)無紙化奠定條件，在多媒體技術(shù)與手繪動畫結(jié)合后，手繪動畫有了更多的選擇，比如畫一幅畫面，可以單純用眼睛和手直接繪畫出來，也用像素來繪制，還可以將拍攝的影像通過軟件模擬成為具有手繪形式的畫面。韓國電影《青澀戀愛》中片頭與片尾就是真人拍攝與手繪風(fēng)格相結(jié)合的方式進行實驗，此片表現(xiàn)的是現(xiàn)代男女純真的愛情生活，影片基調(diào)清晰樸實，尤其是片頭與片尾的動畫對烘托影片氣氛起到了關(guān)鍵的作用，動畫采用的是真人實拍與CG技術(shù)結(jié)合的方式，呈現(xiàn)出的卻是流動的、光影斑駁的水彩質(zhì)感。此動畫運用了圖像處理、三維動畫等技術(shù)手段，畫面既有飽滿的水彩質(zhì)感和紙張的粗糙感，又有三維的景深和鏡頭語言。由此可見，多媒體技術(shù)也在改變對技術(shù)運用的觀念，將技術(shù)的生硬質(zhì)感蛻化成靈活多變的藝術(shù)風(fēng)格。

另一方面手繪動畫家也在探索手繪動畫的美感與多媒體技術(shù)結(jié)合的方式。在宮崎峻的《千與千尋》中，他就使用了CG技術(shù)制作飛濺的千尋的淚花。日本的動畫電影現(xiàn)在使用線條勾勒，背景則使用CG技術(shù)來表現(xiàn)，再經(jīng)過電腦校色，使得背景空間感強，看起來十分逼真。

本論文認(rèn)為這些都還是CG與二維動畫結(jié)合的淺表嘗試，希望保持手繪動畫的畫面質(zhì)感又增加畫面的維度空間，但依然將手繪動畫的制作工藝看成是手繪動畫的精髓，用CG只是作為進行輔助手段。

相對來說，中國對于手繪動畫這一新的發(fā)展方向的探索更加徹底和深入， 2007年，中國中央電視臺播放了一部探索紀(jì)錄片《大唐西游記》（見圖），這是中國動畫的一次突破，非常成功的實現(xiàn)了手繪與CG的互動結(jié)合。這部影片全部由手繪后經(jīng)由CG處理的畫面構(gòu)成。沒有一個實地拍攝的鏡頭，這在全球的紀(jì)錄片的歷史上還是第一次。人物造型以中國傳統(tǒng)彩塑的造型為表現(xiàn)形式?！洞筇莆饔斡洝窂钠平庵袊裨捁适隆段饔斡洝分械娜宋飦須v開始，講述公元7世紀(jì)唐朝僧人玄奘一生的傳奇經(jīng)歷。在敘事畫面的表現(xiàn)上采用了的唐卡表現(xiàn)形式，唐卡是一種歷史悠久的藏傳佛教中的繪畫藝術(shù)，從公元七世紀(jì)發(fā)展至今。以唐卡為造型符號又暗合了印度佛教在中國的傳播過程這一主題，選用彩塑和唐卡的結(jié)合，既是兩種藝術(shù)形式的結(jié)合，也是藝術(shù)和技術(shù)的結(jié)合。

《大唐西游記》創(chuàng)作的實踐意義在于：首先從技術(shù)的角度看, 《大唐西游記》沒有對CG技術(shù)無節(jié)制地濫用，而認(rèn)識到藝術(shù)風(fēng)格才是傳播主題的最核心信息，它突破了二維和三維空間的界限，產(chǎn)生了一種虛擬的時空感，并且產(chǎn)生了一種新的美學(xué)影像?！洞筇莆饔斡洝肥侵袊说谝淮螌⑹掷L、CG、紀(jì)錄片‘三位一體’的影像試驗。是一次科技和藝術(shù)的成功結(jié)合。在如何正確利用先進的技術(shù)，如何使人類悠久的歷史文化和藝術(shù)在新的時代煥發(fā)生命力這一命題上給當(dāng)代動畫人以啟迪。

綜上所述，我們可以看到：手繪動畫還沒有到成熟的階段，手繪動畫的藝術(shù)語言以及表現(xiàn)形式還在不斷的充實豐富。手繪動畫與新媒體技術(shù)之間并不對立與矛盾，而是可以相輔相成的。三維動畫與手繪動畫最大的矛盾在于思考的方式上的差異，三維動畫師需要具備物體三維形狀的能力，會先“畫”出真正存在的東西，理解所畫出東西的立體構(gòu)象并且要灌注設(shè)計的理念，視作品為產(chǎn)品。而手繪動畫師是以平面二維空間的概念進行構(gòu)思，一方面有萬千種材料、表現(xiàn)手段、風(fēng)格進行選擇作為媒介，傾向于反理性和反智性的思維。另一方面，這些媒介的選擇最終是以體現(xiàn)動畫師的個性與世界觀為原則的。手繪動畫的藝術(shù)語言探索還遠(yuǎn)沒有到盡頭，關(guān)于手繪動畫與新媒體技術(shù)的互動性開發(fā)還有待開發(fā)，也許有一天，我們打開電腦就會有一幅水墨畫打開，觸碰畫軸就會有朵朵的墨花綻放。手繪動畫在整個動化領(lǐng)域?qū)⒁云洫毺氐乃囆g(shù)語言綻放出奇異的光彩。

參考文獻

1、 [美]尼葛洛龐帝.胡泳,范海燕譯. 數(shù)字化生存[M].海南出版社,1996：80.

2、賈否，路盛章.動畫概論[M].北京:中國傳媒大學(xué)出版社,2005年版

3、郭春寧.多媒體藝術(shù)流變中的維度探索[D] 中央美術(shù)學(xué)院設(shè)計系,20D3：6.

4、肖永亮.美國的數(shù)字媒體學(xué)科發(fā)展[J].計算機教育,2006,(5).

cg技術(shù)論文范文第3篇

論文摘要：由于自然語言的語義存在不確定性，形式化很困難，因此語義處理成為自然語言處理的瓶頸所在。基于大規(guī)模標(biāo)注語料庫的語義處理已經(jīng)成為發(fā)展趨勢，語料標(biāo)注本質(zhì)上就是語言知識(包括語義)形式化?，F(xiàn)有句法標(biāo)注模型主要包括基于短語結(jié)構(gòu)語法(PSG)和基于依存語法(DG)的句法標(biāo)注模型，還存在一些局限性。文章在現(xiàn)有句法標(biāo)注模型的基礎(chǔ)上結(jié)合認(rèn)知語法(CG)的有關(guān)理論提出改進思路，以探索新的句法標(biāo)注模型。

人類社會發(fā)展的基本軌跡是：原始社會—農(nóng)業(yè)社會—工業(yè)社會—信息社會。人工智能的目標(biāo)是用計算機模擬人的智能，以最大限度地解放和延伸人的智能，無疑是信息社會的制高點。語言是人思維的物質(zhì)外殼，人不可能離開語言而具備真正屬于人的高級智能。因此，模擬人類語言智能的自然語言處理無疑是人工智能的重要研究方向。然而，迄今為止的研究表明，在可以預(yù)見的將來，語義處理將是自然語言處理的瓶頸所在。原因是語義十分復(fù)雜，而基于現(xiàn)有計算機軟硬件的自然語言處理要求語義形式化。解決這一問題的根本之道是：探索新的句法標(biāo)注模型，進行大規(guī)模的語義標(biāo)注，基于語料庫進行語義知識獲取和自然語言處理。

一、句法標(biāo)注模型

語言的復(fù)雜性在于語言與認(rèn)識的關(guān)系。語言具有意義，而意義是入對主客觀世界的認(rèn)識結(jié)果。主客觀世界的復(fù)雜性決定了意義的復(fù)雜性，進一步?jīng)Q定了語言的復(fù)雜性。語言本身又可以視為人的主客觀世界中的一部分，因此語言研究是一種特殊的認(rèn)識活動，是人對語言的認(rèn)識。由此可見，語言離不開認(rèn)識。人對主客觀世界的認(rèn)識可以如此描述：認(rèn)識主體借助認(rèn)識工具按照認(rèn)識方法處理認(rèn)識對象獲得認(rèn)識結(jié)果。認(rèn)識是由多種認(rèn)識因素(主體、工具、方法、對象)共同作用的活動，認(rèn)識結(jié)果是這一活動的產(chǎn)物，被多種認(rèn)識因素共同決定，任何一種認(rèn)識因素的改變必然導(dǎo)致認(rèn)識結(jié)果出現(xiàn)或大或小的差異。顯然，認(rèn)識結(jié)果與認(rèn)識對象不能等同，是認(rèn)識主體對認(rèn)識對象的選擇性反映，認(rèn)識具有主觀能動性。從這個意義上講。認(rèn)識不可能也不應(yīng)該去被動地還原認(rèn)識對象，而是從符合主體目的性出發(fā)，力求簡單有效地描述和預(yù)測認(rèn)識對象。借用模型的概念，認(rèn)識結(jié)果就是認(rèn)識對象的模型(model)，認(rèn)識就是建立認(rèn)識對象的模型，簡稱建模(modeling)。這是一種實用主義認(rèn)識觀。

模型一般分為心理模型(psychological model)、數(shù)學(xué)模型(mathematical model)和物理模型(physical model)。心理模型是認(rèn)識對象在人認(rèn)識中的定性關(guān)系，是數(shù)學(xué)模型的基礎(chǔ)；數(shù)學(xué)模型是認(rèn)識對象在人認(rèn)識中的定量關(guān)系，是物理模型的基礎(chǔ)；物理模型是人借助特定材料和工具按照認(rèn)識對象的數(shù)學(xué)模型實現(xiàn)的物質(zhì)結(jié)構(gòu)。傳統(tǒng)意義上的建模主要指建立數(shù)學(xué)模型和物理模型，一般意義上的建模還包括建立心理模型。人的認(rèn)識能力是有限的，表現(xiàn)在：人不能建立任意認(rèn)識對象的心理模型，也不能建立任意心理模型的數(shù)學(xué)模型，也不能建立任意數(shù)學(xué)模型的物理模型。由于具有明確的實用主義特點，建模在理工科領(lǐng)域大行其道，在文科領(lǐng)域也逐漸受到青睞。人類將二進制數(shù)學(xué)模型成功實現(xiàn)為晶體管物理模型，并開發(fā)出越來越復(fù)雜和先進的計算機軟件和硬件，從而進入信息時代。20世紀(jì)以來一些主要或次要的語言理論都或多或少應(yīng)用了數(shù)學(xué)模型，特別是一些面向語言計算的語言理論。隨著計算機技術(shù)的飛速發(fā)展，人們對計算機自動或輔助處理語言信息的需求越來越大。但計算機的根本缺陷在于，凡是不能建立數(shù)學(xué)模型的信息都無法處理。傳統(tǒng)語言理論往往只在心理模型層面定性研究，無法滿足這一需要。因此有必要引入數(shù)學(xué)模型研究語言，稱為語言數(shù)學(xué)模型，簡稱語言模型(1anguage model)。統(tǒng)計語言模型(sta-tistical language model)就是一個成功的例子。但統(tǒng)計語言模型的性能取決于訓(xùn)練語料的規(guī)模和質(zhì)量。目前，由于語料的不斷積累和計算機技術(shù)的不斷進步，語料規(guī)模已不成問題，語料中包含語言知識的數(shù)量和質(zhì)量才是關(guān)鍵。

計算機的語言知識主要來源于人。將語料中包含的語言知識標(biāo)注出來，有助于計算機獲得更豐富、更有價值的語言知識，從而提高語言處理水平，這就是語料標(biāo)注(corpus tagging)。一般認(rèn)為主要包括詞匯標(biāo)注(1exical tagging，分詞、詞結(jié)構(gòu)標(biāo)注、詞性標(biāo)注、詞義標(biāo)注等)、句法標(biāo)注(syntax tagging，語法樹標(biāo)注、語義樹標(biāo)注等)、語篇標(biāo)注(discourse tagging，語體標(biāo)注、領(lǐng)域標(biāo)注等)等內(nèi)容。經(jīng)過標(biāo)注的語料還可以用于語言學(xué)研究、語言教學(xué)、語言測試、詞典編撰等諸多理論研究和實踐應(yīng)用領(lǐng)域，越來越受到人們重視，并形成一門新興學(xué)科——語料庫語言學(xué)(corpus linguistics)。目前，相對句法標(biāo)注，詞匯標(biāo)注有更成熟的規(guī)范、準(zhǔn)確率更高的技術(shù)和更大的標(biāo)注規(guī)模。句法標(biāo)注的主要困難在于，沒有一個真正成熟的語法或語義標(biāo)注模型。句法結(jié)構(gòu)尤其是語義結(jié)構(gòu)很難統(tǒng)一描述，現(xiàn)有的句法理論還不完善，難以制定統(tǒng)一規(guī)范，標(biāo)注主觀性很大，自動標(biāo)注準(zhǔn)確率比較低。因此，句法標(biāo)注成了語料標(biāo)注的瓶頸問題。由于句法知識在語言知識中的重要地位，有理由相信：如果有了大規(guī)模、高質(zhì)量的句法標(biāo)注語料庫，圍繞語料庫的各種研究和應(yīng)用有可能在現(xiàn)有基礎(chǔ)上產(chǎn)生質(zhì)的飛躍。因此，研究句法標(biāo)注模型應(yīng)是當(dāng)務(wù)之急。語料庫語言學(xué)屬于交叉學(xué)科，句法標(biāo)注模型是語料庫語言學(xué)的基礎(chǔ)理論，又與語言學(xué)的句法理論密切相關(guān)。一方面可以借鑒現(xiàn)有句法理論，另一方面，也可以從語料庫語言學(xué)的角度研究句法，提出新的句法標(biāo)注模型。

二、現(xiàn)有句法標(biāo)注模型

句法標(biāo)注(Syntax Tagging，ST)以句子的語法知識和語義知識為標(biāo)注對象，是語料標(biāo)注的重點、難點所在，要以一定的語法理論為基礎(chǔ)。根據(jù)語法理論制定的句法標(biāo)注規(guī)則、過程和結(jié)果，稱為句法標(biāo)注模型(Syntax Tagging Model，STM)。短語結(jié)構(gòu)語法(PhraseStructure Grammar，PSG)和依存語法(DependencyGrammar，DG)是現(xiàn)有句法標(biāo)注的兩種基礎(chǔ)語法理論，彼此卻有很大的不同?；赑SG的句法標(biāo)注模型稱為短語結(jié)構(gòu)句法標(biāo)注模型(PSG—based Tagging Mod—el，PSGTM)，基于DG的句法標(biāo)注模型稱為依存句法標(biāo)注模型(DG—based Tagging Model，DGTM)。根據(jù)現(xiàn)有語料標(biāo)注的實踐結(jié)果來看，PSGTM與DGTM都存在一定缺陷。

美國語言學(xué)家喬姆斯基(Noam Chomsky)于1957年出版專著《句法結(jié)構(gòu)》，從而奠定了短語結(jié)構(gòu)語法(PSG)的理論基礎(chǔ)。其后發(fā)展起來的許多語法理論可以直接或間接歸到這一流派，如中心詞驅(qū)動的短語結(jié)構(gòu)語法(HPSG)、廣義短語結(jié)構(gòu)語法(GPSG)等。到目前為止，PSG仍然是最重要的句法標(biāo)注基礎(chǔ)理論，為世界上眾多語料庫項目所采用和發(fā)展。法國語言學(xué)家特思尼耶爾(Lucien Tesnire)于1959年出版專著《結(jié)構(gòu)句法基礎(chǔ)》，從而奠定了依存語法(DG)的理論基礎(chǔ)。其后發(fā)展起來的許多語法理論可以直接或間接歸到這一流派，如詞匯依存語法(WD)、概念依存理論(cD)、核心依存理論(KD)等。相對PSG而言，DG偏重于語義，在CD、KD上表現(xiàn)得十分明顯。另外，DG更簡潔、直觀、經(jīng)濟，適應(yīng)性更強，因此反而有后來居上之勢，目前已經(jīng)成為世界上較為通用的句法標(biāo)注基礎(chǔ)理論。不過，在具體的句法標(biāo)注實踐中DGTM還是暴露出一些問題，“對一些沒有明確依存關(guān)系的成分，標(biāo)注起來則有些力不從心”，存在“依存失敗”現(xiàn)象，最突出的是難以標(biāo)注缺省結(jié)構(gòu)。缺省結(jié)構(gòu)一直是句法標(biāo)注中經(jīng)常出現(xiàn)而且很難解決的問題。

人類的自然語言符合經(jīng)濟性原則，而缺省結(jié)構(gòu)恰恰體現(xiàn)了這一原則。借助句子的前后上下文省略一些成分，人們?nèi)匀荒軌蚶斫猓珜τ嬎銠C來說卻是一種挑戰(zhàn)。句法標(biāo)注的根本目的是讓計算機能夠正確提取句子的語法和語義知識。缺省結(jié)構(gòu)在真實語料中大量出現(xiàn)，常常使得原本正常的句法結(jié)構(gòu)變得異常，難以按已有規(guī)則進行標(biāo)注。這是任何句法標(biāo)模型都必須面對的問題，目前PSGTM和DGTM都還沒能夠很好地解決。以DGTM為例，在很多情況下，DGTM不但不能正確標(biāo)注缺省結(jié)構(gòu)，反而在一些語言規(guī)則的強制限定下給出違背真實語法或語義結(jié)構(gòu)的標(biāo)注結(jié)果，形成干擾信息。請看以下4個句子：

句1：我看一下下書

句2：(真是好書啊?)我看一下

句3：我看一本書

句4：(好多書啊!)我看一本

句2是句1的賓語省略句，句4是句3的賓語省略句。(為簡便起見，把“一下”、“一本”作為一個詞處理)。

問題出在句4。句1和句3的依存結(jié)構(gòu)是不同的，然而句2和句4卻有了相同的依存結(jié)構(gòu)。因為句4省略了“書”，根據(jù)DG理論，“一本”必須依存于獨立謂語成分“看”。于是“看一本”和“看一下”依存結(jié)構(gòu)相同，實際上違反了句3的正確結(jié)構(gòu)。當(dāng)然，我們可以采取補救措施，為d1標(biāo)注一個特殊的依存關(guān)系屬性Cerror(即依存失敗)，但這不是好辦法。

三、改進DGTM

美國認(rèn)知語言學(xué)家蘭蓋克(Ronald w.Langach.er)分別于1987年、1991年出版專著《認(rèn)知語法基礎(chǔ)》一、二卷，開創(chuàng)了認(rèn)知語法(CG)理論，關(guān)于語法結(jié)構(gòu)有如下觀點：如果一個構(gòu)件A使另一構(gòu)件B的一部分抽象變?yōu)榫唧w，那么構(gòu)件A就叫做概念自主(coneep.tually autonomos)的構(gòu)件，構(gòu)件B就叫做概念依存(conceptually dependent)的構(gòu)件。

舉例來說：獨立地看，“一本”隱含一個抽象的、可數(shù)的、可用“本”量化的事物，可表示為“一本(x)”。“書”使“x”變得具體，因此“書”是概念自主的，“一本”是概念依存的。從信息表達的角度來看，“書”表達了相對完整而具體的信息，因此是概念自主的；“一本”表達了不完整不具體的信息，因此是概念依存的。從數(shù)學(xué)表達式的角度來看，“一本”類似函數(shù)，“書”類似參數(shù)，函數(shù)的地位顯然是第一位的，決定了對參數(shù)的處理過程和返回參數(shù)。例如，“舊書”與“一本書”的區(qū)別不在“書”，而在“舊”和“一本”。再從閱讀認(rèn)知過程來看，當(dāng)人們讀到“一本”時，實際上已經(jīng)在期待“一本”后面那個具體事物跟著出現(xiàn)。為什么我們覺得“我看一本”是缺省句?因為“看”和“一本”相對“書”都是概念依存的，因此人們會判定，“我看一本”的缺省成分可能是“書”。而讀到“我看書”時，人們不會認(rèn)為這是一個省略句，因為“書”表達的信息已經(jīng)自足了。

由此有足夠的理由認(rèn)為：在句法結(jié)構(gòu)中，“一本”應(yīng)是“書”的父結(jié)點，而不是按傳統(tǒng)的補足中心原則，中心成分總是限定成分的父結(jié)點。依存成分是自主成分的父結(jié)點，這一原則可以稱為依存中心原則(Dependency Head Principle，DHP)。采取這種原則的DGTM必然會有不同的標(biāo)注結(jié)果。

深入研究發(fā)現(xiàn)，僅僅采用DHP是不夠的，DGTM的其他參數(shù)也需要改變。例如，“看(x)”和“一本(x)”這兩個表達式在與其他詞語組合時是有區(qū)別的?！翱?x)”與“我”組合時由“看”與“我”產(chǎn)生聯(lián)系?！翱础迸c“一本(x)”組合時卻是“x”(書)與“看”發(fā)生聯(lián)系。代表表達式與其他詞語組合的成分稱為返回參數(shù)，不同表達式的返回參數(shù)是不同的。例如。“一本(x)”返回參數(shù)為“x”，“看(x)”返回參數(shù)為“看”。正因為如此，表達式“看(一本(書))”成立，“一本(看(書))”不成立。另外，表達式“(x)一下”的返回參數(shù)為“x”，即“看”；表達式“(x)看”的返回參數(shù)為“看”。根據(jù)這些定義，句1、2、3、4的改進DGTM。

根據(jù)函數(shù)、輸入?yún)?shù)、返回參數(shù)的關(guān)系，各句結(jié)構(gòu)的逆構(gòu)造過程如下：

句1：我看一下書：(((我)看(x))一下)(書)=((看(x))一下)(書)=看(x)(書)=看(x=書)

句2：我看一下：((我)看(x))一下=(看(x))一下=看(x)

句3：我看一本書：((我)看(x))(一本(書))=看(x)(書)=看(x=書)

句4：我看一本：(我)看(一本(x))=看(x)

句1和句3的x有明確取值，為完整句。句2和句4則是缺省句?；诳?x)和一本(x)的知識，可以預(yù)測并判定缺省結(jié)構(gòu)及其成分。

直觀看來，改進DGTM與原DGTM的標(biāo)注結(jié)果有了很大的差異由于不采用補足中心原則，因此改進DGTM標(biāo)注結(jié)果并不符合在補足中心原則影響下人們長期以來形成的語感。但更符合人們閱讀認(rèn)知經(jīng)驗，而且可以按函數(shù)標(biāo)準(zhǔn)給出形式化地解釋，其解釋結(jié)果符合句子本身的語法和語義結(jié)構(gòu)，沒有錯誤和干擾信息。因此，改進DGTM更適合計算機處理，更符合句法標(biāo)注的本來目的。

四、結(jié)語

PSGTM的語法理論基礎(chǔ)是PSG，DGTM的語法理論基礎(chǔ)是DG，改進DGTM的DHP受CG的啟發(fā)，其語法理論基礎(chǔ)應(yīng)該是CG。但CG只是從理論上提出了“概念自主”和“概念依存”的概念，并沒有嚴(yán)格定義和證明依存成分與自主成分之間的主從關(guān)系。在CG的實際應(yīng)用中，存在有時自主成分為短語中心語，有時依存成分為短語中心語的情況。

cg技術(shù)論文范文第4篇

關(guān)鍵詞：豬流產(chǎn)嗜性衣原體；主要外膜蛋白（MOMP）；重組表達

中圖分類號：S852.67 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）04-0949-04

Cloning and Expression of Major Outer Membrane Protein of Chlamydophila Clinical Strain HB1043 from Swine

YAN Shao-xia1，2，TIAN Yong-xiang1，LIU Ze-wen1，YUAN Fang-yan1，GUO Rui1，DUAN Zheng-ying1，

YANG Ke-li1，MENG li1，ZHOU Dan-na1，LI Shao-wen2

（1. Institute of Animal Husbandry and Veterinary， Hubei Academy of Agricultural Sciences， Wuhan 430064，China； 2. College of Animal Science and Technology， Huazhong Agricultural University， Wuhan 430070，China）

Abstract： Chlamydophila was an obligate intracecullar parasites and could infect human and multiple animals. According to the published complete nucleotide sequence of Chlamydophila major outer membrane protein （MOMP） in the GenBank and the whole genome of Chlamydophila isolated from clinical samples， the whole genome sequence of MOMP gene were obtained by PCR. The PCR product was sequenced and blasted with the committed MOMP sequence （EU531729） from strain CG1 of swine Chiamydophila abortus. The results showed that it had one base different from the CG1 strain. The extinction enzymes sites BamHⅠand SalⅠwere selected for cloning the MOMP sequence to the pET-28a. The restructuring plasmid pET-28α-MOMP were then transfered into E. coli BL21 and expressed. The target protein rMOMP was purified by the Ni Sepharose 6 Fast Flow and proved with immunocompetence by Western-blot.

Key words： Chlamydophila； major outer membrane protein； recombined expression

衣原體是一類細(xì)胞內(nèi)專性寄生的、大小介于細(xì)菌和病毒之間的革蘭氏陰性微生物。衣原體感染在世界范圍內(nèi)均有流行，是一種能夠引起人和動物患病的人畜共患病原體。依據(jù)衣原體核糖體rRNA的序列比對以及多態(tài)性限制性酶切位點的分析，將衣原體科分為衣原體屬和嗜性衣原體屬。

嗜性衣原體屬包含鸚鵡熱嗜性衣原體、流產(chǎn)嗜性衣原體、肺炎嗜性衣原體、家畜嗜性衣原體、貓嗜性衣原體以及豚鼠嗜性衣原體[1]。其中，危害最大的病原體主要是流產(chǎn)嗜性衣原體和鸚鵡熱嗜性衣原體。流產(chǎn)嗜性衣原體是從鸚鵡熱嗜性衣原體中衍生出來的一個新成員，這兩種病原體都可以感染豬、綿羊、山羊、牛等哺乳動物，同時作為一種人畜共患的病原體，經(jīng)常與感染動物接觸的人可經(jīng)呼吸道傳播的途徑發(fā)生感染。人類感染后主要表現(xiàn)為類似流感的病癥，嚴(yán)重時可引起心內(nèi)膜炎、腦炎、肺炎、流產(chǎn)甚至死亡[2]。

近些年來，研究者對衣原體的基因組學(xué)以及蛋白質(zhì)組學(xué)進行了深入的研究，但是針對衣原體病的診斷目前尚沒有十分成功的試劑盒得以推廣應(yīng)用。根據(jù)以往的研究報道，作為研究熱點的診斷抗原蛋白有主要外膜蛋白（MOMP）、多型性外膜蛋白（POMPs）、熱休克蛋白（HSP）以及脂多糖（LPS）等。其中40 ku的衣原體MOMP占衣原體外膜蛋白的60%以上，具有血清型、亞種、種和屬特異性抗原決定簇，是衣原體病診斷的主要研究抗原[3]。有研究者對流產(chǎn)嗜性衣原體的CP/12株的MOMP、E型沙眼衣原體的MOMP以及雞源鸚鵡熱衣原體的MOMP全長基因進行了克隆表達[4-6]。

本試驗所用的病原為臨床分離病原，是經(jīng)特異性引物進行PCR鑒定后的衣原體。經(jīng)雞胚攻毒試驗證明其具有很強的致死性，致死的雞胚病理變化與以往研究報道相符。同時，實驗室對該病原體的16 S/23 S/16-23 S rRNA進行擴增并經(jīng)分析鑒定其屬于嗜性衣原體屬。在系統(tǒng)進化樹中，其與鸚鵡熱嗜性衣原體和流產(chǎn)嗜性衣原體親緣關(guān)系較近，共用一個節(jié)點，但不與鸚鵡熱嗜性衣原體和流產(chǎn)嗜性衣原體共枝[7]。鑒于該株嗜性衣原體具有很強的致病致死性，本試驗對其主要外膜蛋白進行選擇性原核表達，并驗證其免疫學(xué)活性，以期為下一步開發(fā)豬的衣原體病診斷試劑盒打下理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

豬源衣原體HB1043株表達載體pET-28a、感受態(tài)細(xì)胞Escherichia coli DH5α、E. coli BL21由湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所獸醫(yī)室保存；限制性內(nèi)切酶BamHⅠ和SalⅠ、T4 DNA連接酶、DNA Marker以及PCR反應(yīng)試劑等均購自寶生物工程（大連）有限公司；HRP標(biāo)記的羊抗豬購自SoutherBiotech；豬衣原體陽性血清為本室衣原體IHA試劑盒（購自湖北省畜牧獸醫(yī)局）檢測呈陽性的豬血清；AxyPrep凝膠回收試劑盒購自杭州愛思進生物技術(shù)有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 引物設(shè)計 根據(jù)GenBank中MOMP全基因序列設(shè)計特異性引物上游P1：TTAGGATCCATGAA

AAAACTCTTGAAATCG，前加酶切位點BamHⅠ；下游P2：GCGGTCGACTTAGAATCTGAATTGAGC，前加酶切位點SalⅠ。引物由生工生物工程（上海）技術(shù)服務(wù)有限公司合成。

1.2.2 目的基因擴增 使用Biospin細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒（Bioer Technology co. Ltd，BSC12S1）提取衣原體基因組。取適量臨床分離株接毒致死的雞胚卵黃囊液于1.5 mL離心管中，3 000 r/min離心10 min，取上清液，再15 000 r/min離心30 min，棄上清液，按照試劑盒操作步驟提取基因組。以提取的衣原體全基因組DNA為模板，特異性的引物P1、P2為引物進行PCR反應(yīng)，反應(yīng)程序為94 ℃預(yù)變性2 min；94 ℃變性15 s，58 ℃退火30 s，72 ℃延伸1 min，30個循環(huán)；72 ℃ 10 min，4 ℃保存。PCR產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳鑒定。采用AxyPrep凝膠回收試劑盒（杭州愛思進生物技術(shù)有限公司，AP-GX-50）對PCR產(chǎn)物進行回收，測序。

1.2.3 MOMP基因序列及蛋白特性分析 使用DNAStar、SignalP 3.0 Server等軟件對測序結(jié)果進行分析，并與GenBank中衣原體的MOMP序列進行同源性分析。

1.2.4 構(gòu)建重組質(zhì)粒pET-28a-MOMP 根據(jù)分析結(jié)果，選用BamHⅠ和SalⅠ對PCR產(chǎn)物及質(zhì)粒pET-28a進行雙酶切。經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳鑒定后，采用DNA Fragment Purification Kit ver.2.0（寶生物工程（大連）有限公司，DV807A）對酶切產(chǎn)物進行回收。

將帶有黏性末端的酶切產(chǎn)物使用T4 DNA連接酶反應(yīng)體系連接。連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞E.coli DH5α，轉(zhuǎn)化方法按常規(guī)轉(zhuǎn)化步驟進行。篩選出陽性克隆后小量搖菌，使用E.Z.N.A.Plasmid Midi Kit Ⅰ（Omega Bio-Tek，D6944-01）試劑盒提取質(zhì)粒。提取的質(zhì)粒經(jīng)PCR及酶切鑒定，以確定目的片段正確克隆入載體，重組載體命名為pET-28a-MOMP。

1.2.5 重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化 上一步中構(gòu)建好的重組質(zhì)粒pET-28a-MOMP轉(zhuǎn)化表達載體E. coli BL21。按常規(guī)轉(zhuǎn)化方法進行。

1.2.6 誘導(dǎo)表達 將上一步中轉(zhuǎn)化成功的表達菌E. coli BL21接種LB培養(yǎng)基進行誘導(dǎo)表達，同時設(shè)置對照組：含空質(zhì)粒pET-28a的E. coli BL21組。具體操作見文獻[8]。

采用SDS-PAGE凝膠配制試劑盒（武漢博士德生物工程有限公司，AR0138）檢測蛋白質(zhì)表達情況。誘導(dǎo)表達過程中所取的樣品均按照常規(guī)方法處理。按試劑盒使用說明配膠，上樣各20 μL，同時加Protein Marker。80 V，40 min后120 V至電泳完成。電泳完畢后進行考馬斯亮藍染色，觀察蛋白表達情況。

1.2.7 rMOMP純化 重新誘導(dǎo)表達重組蛋白rMOMP。具體操作見文獻[8]。

使用Ni Sepharose 6 Fast Flow親和層析柱除去雜蛋白。具體步驟按使用說明書進行。最后洗脫時采用咪唑濃度梯度洗脫，咪唑濃度分別為100、200、300 mmol/L的洗脫液洗脫目的蛋白；洗脫完成后加復(fù)性劑使重組蛋白復(fù)性；最后使用蔗糖濃縮蛋白液濃縮；收集蛋白，1.5 mL離心管分裝，-70 ℃保存。其中每個步驟取樣待檢。

SDS-PAGE電泳檢測蛋白表達及純化情況，拍照。

1.2.8 rMOMP活性檢測 重新誘導(dǎo)表達，SDS-PAGE電泳結(jié)束后切膠進行Western-blot檢測其免疫學(xué)活性，同時做陰性對照，具體操作見文獻[8]。其中陽性組和陰性組所用一抗為經(jīng)IHA試劑盒檢測確定的陽性血清及陰性血清。觀察結(jié)果并拍照。

2 結(jié)果與分析

2.1 測序結(jié)果及分析

使用DNAStar對MOMP測序結(jié)果分析顯示，擴增得到的MOMP序列全長為1 176 bp，編碼的蛋白質(zhì)為391個氨基酸，分子質(zhì)量約為42.4 ku。由Protean軟件分析其表面抗原位點如圖1所示。從圖中可看出第20-90位氨基酸殘基之間的區(qū)段雖然抗原性位點較強但是其可能不是表面抗原位點，而在100位、240位以及345位氨基酸殘基處抗原性較強，而且均可能為表面抗原位點。

測序結(jié)果經(jīng)BLAST比對顯示，擴增的MOMP與GenBank中流產(chǎn)嗜性衣原體CG1株的MOMP全序列（EU531729）有1個堿基不同，而且此位點突變后CG1株中原有的限制性內(nèi)切酶位點MsⅡ消失；與鸚鵡熱嗜性衣原體C1/97株以及GD株有3個堿基位點不同。

SignalP 3.0 Server分析結(jié)果如圖2，全部391個氨基酸殘基中最有可能為信號肽的是前22個氨基酸殘基。

對序列進行限制性酶切位點分析，在271 bp處為限制性內(nèi)切酶BamHⅠ位點，而且經(jīng)此酶切位點切割后后續(xù)堿基序列的讀碼框并未受到影響。結(jié)合前面的分析結(jié)果，將此限制性內(nèi)切酶位點前的序列切除，對后面部分進行選擇性表達。

2.2 PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果

以提取的衣原體全基因組為模板，特異性引物P1、P2為引物PCR擴增目的蛋白MOMP的全基因片段，其產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳如圖3所示。從圖中可以清晰地找到目的條帶，大小在1 200 bp左右，與預(yù)期大小相符，說明PCR得到了MOMP的全基因片段。

2.3 SDS-PAGE檢測結(jié)果

蛋白純化過程中收集的各階段樣品進行SDS-PAGE電泳檢測結(jié)果如圖4。由圖4可知，含有空載體pET-28a的BL21組在誘導(dǎo)前后的蛋白表達情況基本上沒有不同，只是蛋白量的多少不同；而含有pET-28a-MOMP重組載體的BL21組在經(jīng)加入誘導(dǎo)劑IPTG后在42.4 ku大小處可以明顯觀察到有新的蛋白產(chǎn)生，其大小與目的蛋白rMOMP的預(yù)測大小一致，說明目的蛋白得到很好的表達；菌體經(jīng)超聲破碎后的上清中沒有目的蛋白，說明目的蛋白是以包涵體沉淀的形式存在的；3個不同咪唑濃度的洗脫液電泳結(jié)果說明咪唑濃度在100 mmol/L時為最佳的洗脫條件；濃縮后的蛋白樣品電泳結(jié)果說明經(jīng)過純化，蛋白溶液中的雜蛋白基本上被除去。

2.4 rMOMP活性檢測結(jié)果

對純化得到的rMOMP進行Western-blot試驗，結(jié)果如圖5。由圖5可知，rMOMP與豬衣原體的陽性血清發(fā)生了反應(yīng)，而與陰性血清不反應(yīng)，說明得到的蛋白具有免疫學(xué)活性。

3 小結(jié)與討論

衣原體的外膜結(jié)構(gòu)與其他革蘭氏陰性菌不同，其缺乏肽聚糖成分，由脂多糖代替。整個分子的穩(wěn)定性由40 ku的主要外膜蛋白（MOMP）、富含半胱氨酸的60 ku的大蛋白和12 ku的小蛋白通過廣泛的二硫鍵結(jié)合形成網(wǎng)絡(luò)狀來維持。分子生物學(xué)研究表明MOMP是一種膜孔類蛋白，其結(jié)構(gòu)類似于大腸桿菌的OmpF和PhoE通過疏水性和靜電力結(jié)合形成的三聚體。MOMP的這個三聚體結(jié)構(gòu)是由3個MOMP單體構(gòu)成，在單體內(nèi)部及單體之間存在廣泛的二硫鍵[9]。Rodriguez-Maranon構(gòu)建的MOMP分子模型中，MOMP單體是由16個反向平行的β-卷曲形成的圓桶狀的分子通道結(jié)構(gòu)。MOMP的4個VD區(qū)則位于桶狀結(jié)構(gòu)的外表面，與EB的黏附及進入真核細(xì)胞有直接的關(guān)系[10]。許多研究資料均表明，MOMP具有很強的抗原活性而且是制備衣原體疫苗最佳的候選單位[11，12]。

信號肽在蛋白外源表達過程中對蛋白的產(chǎn)率、降解以及產(chǎn)物加工復(fù)性等都有很大的影響[13]。該試驗對臨床分離的衣原體MOMP全基因片段進行了擴增、測序以及序列分析。分析結(jié)果顯示，此株衣原體與已報道的CG1株流產(chǎn)嗜性衣原體的MOMP序列有一個堿基突變，而該位點突變后，CG1株中原有的限制性內(nèi)切酶位點MsⅡ消失，關(guān)于該酶切位點的有無對MOMP性質(zhì)的影響有待進一步研究分析。同時根據(jù)序列分析結(jié)果將限制性內(nèi)切酶位點BamHⅠ之前部分序列切除后進行了誘導(dǎo)表達。表達產(chǎn)物經(jīng)純化后通過Western Blot檢測其免疫學(xué)活性，結(jié)果證明試驗中所得到的蛋白仍然具有免疫學(xué)活性。關(guān)于該株衣原體的MOMP可否作為診斷抗原并進一步開發(fā)豬衣原體病的檢測試劑盒等問題將在后續(xù)試驗中加以論證。同時該試驗結(jié)果也為衣原體基因工程疫苗的研究提供了理論參考。

參考文獻：

[1] EVERETT K D，ANDERSEN A A. Identification of nine species of the chlamydiaceae using PCR-RFLP[J]. International Journal of Systematic Bacteriology，1999，49（2）：803-813.

[2] RODOLAKIS A， MOHARMAD Y K. Zoonotic potential of chlamydophila[J]. Veterinary Microbiology，2010，140（3-4）：382-391.

[3] 邱昌慶. 衣原體基因組學(xué)與蛋白組學(xué)研究進展[J]. 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，2007，27（1）：94-99.

[4] 栗紹文.豬流產(chǎn)嗜性衣原體抗體EUSA檢測與基因免疫研究[D].武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008.

[5] 呂 慧. E型沙眼衣原體MOMP基因重組腺病毒及其轉(zhuǎn)染樹突狀細(xì)胞的免疫效果研究[D]. 濟南：山東大學(xué)，2007.

[6] 周繼章. 禽源鸚鵡熱衣原體主要外膜蛋白（MOMP）基因重組腺病毒載體的構(gòu)建與鑒定[J].中國獸醫(yī)科學(xué)，2006，36（1）13-17.

[7] 周丹娜，閆少俠，劉澤文，等. 豬源衣原體HB1043株分子鑒定及進化分析[A].閻漢文.中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會2011學(xué)術(shù)年會論文集[C].成都：中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會，2011.410.

[8] SAMBROOK J F，RUSSELL D W. Molecular cloning：A Laboratory manual[M]. New York： Cold Spring Harbor Laboratory Press， 2001.1968-1987.

[9] SUN G， PAL S， SARCON A K， et al. Structural and functional analyses of the major outer membrane protein of Chlamydia trachomatis[J]. Journal of Bacteriology，2007，189（17）：6222-6235.

[10] GROMIHA M M，AHMAD S，SUWA M. Neural network-based prediction of transmembrane β-strand segments in outer membrane proteins[J]. Computational Chemistry，2004，25（5）：762-767.

[11] BATTEIGER B E， NEWHALL W J， TERHO P， et al. Antigenic analysis of the major outer membrane protein of Chlamydia trachomatis with murine monoclonal antibodies[J]. Infection and Immunity，1986，53（3）：530-533.

cg技術(shù)論文范文第5篇

關(guān)鍵詞：基因多態(tài)；急性高山病；發(fā)生率；低氧習(xí)服

中圖分類號：G804.7 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：1007-3612(2010)12-0045-03

The Effects of Polymorphisms of ANP on the Incidence and the Hypoxia Acclimatization to Acute Mountain Sickness

ZHOU Wenting1, HU Yang1，XU Fei2

(1.Beijing Sport University, Beijing 100084，China；2.Zhejiang University of Technology， Hangzhou 310023,Zhejiang China)

Abstract:Objectives: To study the effects of polymorphisms of ANP at C664G and T2238C loci on the incidence and the hypoxia acclimation to Acute Mountain Sickness (AMS). Methods: Phase 1: 61 students, all male Chinese Han origin lowlanders, were involved in a 6h acute exposure to 4800m altitude equivalent. Within 30 min of arriving at altitude, volunteers exercised at constant work rate for 20 min on a cycle ergometer (70r/min). Phase 2: After 1wk of rest, 48 volunteers completed an exercise performance testing in a 3wk period of IAE (2h/d, 4d/wk). After restoring 1wk, Phase 1 was repeated. Incidence and severity of AMS symptoms were determined using the LLS. PCR RFLP was used to determine the genotypes and alleles frequencies of ANP at C664G and T2238C loci. Results: After the altitude exercise, 62.5% volunteers won better hypoxia tolerance while the AMS incidence rate is decreasing from 49.2% to 18.7%. But there are no significant differences in AMS score trends in different genotypes and allele carriers at C664G and T2238C loci. Conclusions: Training in intermittent altitude exposures is remarkable effective for the hypoxia acclimation to AMS. No association exists between polymorphisms of ANP and the incidence of AMS as well as the hypoxia acclimation to AMS.

Key words: polymorphism; acute mountain sickness; incidence frequency; hypoxia acclimation

我國國土總面積約1/6為海拔3 000 m以上的高山/高原地區(qū)。隨著經(jīng)濟、文化及國防的發(fā)展，進入高原的人逐年增多。與世居高原人不同，世居平原人在高原多發(fā)急性高山病(acute mountain sickness, AMS)，出現(xiàn)多種不適癥狀，嚴(yán)重者甚至出現(xiàn)高原肺水腫和高原腦水腫，危及生命［1］。研究發(fā)現(xiàn)，增加氧攝入量和促進利尿可加快AMS的習(xí)服［2］，故目前普遍采用階段適應(yīng)及服藥來預(yù)防AMS［3］。然而，階梯適應(yīng)方式往往耗費大量人力、物力和時間，服藥又多伴有各種副作用，故尋找更有效的方法降低AMS的發(fā)生及嚴(yán)重程度具有重要的研究價值。已知急性低氧暴露期內(nèi)運動可引起低氧血的增多與鈉潴留的加劇，加重AMS，適當(dāng)劑量的低氧暴露和/或訓(xùn)練則可能改善、緩解AMS的癥狀［4］。

研究表明，急進高原人群中AMS的發(fā)生率約為30%～80%，以階梯適應(yīng)的方式進入高原雖可明顯減少AMS的發(fā)生，但仍有30%的人患病，而在急進高原人群中亦有約16%～30%的人并不發(fā)生AMS，可見AMS的確存在易感性的差異［5］。動物實驗發(fā)現(xiàn)低氧會導(dǎo)致ANP的分泌增加［6］，AMS與ANP的關(guān)聯(lián)研究則結(jié)果不一［7，8］。本研究模擬4 800 m低氧環(huán)境，急性暴露輔以運動，使受試者出現(xiàn)AMS癥狀。首次對受試者施以3周漸進式低氧訓(xùn)練，觀察間歇式低氧暴露（intermittent altitude exposures, IAE）輔以運動對AMS的減緩程度。通過基因解析，本研究首次對我國世居平原北方漢族男性ANP基因C-664G及T2238C位點基因多態(tài)性與AMS發(fā)生及低氧習(xí)服效果的關(guān)系進行了探索。

投稿日期：2010-05-15

基金項目：科技部奧運攻關(guān)課題(2006BAK12B01)。通訊作者：胡揚教授。

作者簡介：周文婷，講師，博士，北京體育大學(xué)體育學(xué)博士后流動站博士后，研究方向基因技術(shù)與運動員選材。

1 材料和方法

1.1 實驗對象和樣本 61名普通男性大學(xué)生參與Phase 1的研究，其中48名參與后續(xù)Phase 2的研究。受試者身體健康，無神經(jīng)系統(tǒng)、心肺、心血管系統(tǒng)疾病及吸煙史；均為北方漢族世居平原者（海拔＜800 m），主要來自山東、河北、東北三省。實驗前6個月未經(jīng)高原和（或）低氧暴露（海拔≥1 500 m）。受試者實驗前填寫PARQ問卷，簽署知情同意書?？崭钩槿§o脈血5 mL, EDTA-Na2抗凝，分離白細(xì)胞，-20℃保存。

1.2 方法

1.2.1 運動及低氧暴露 Phase 1：受試者于低氧艙（模擬海拔4 800 m，吸入氧濃度(FiO2)10.4%～10.8%，溫度20℃～24℃，相對濕度46%～67%，氣壓1 014～1 021 hPa）暴露6 h。進艙后休息30 min，然后進行30 min的運動測試：在GE Ergoselect 1 000 LP型臥式功率車上仰臥休息5 min后，以恒定負(fù)荷（80 W, 60轉(zhuǎn)/min）蹬車20 min，恢復(fù)5 min，運動終止標(biāo)準(zhǔn)參照［9］。運動結(jié)束后，受試者在6 h的剩余時間內(nèi)靜息暴露。以LLS量表評價AMS［10］，運動前和運動后即刻、低氧暴露4 h和6 h結(jié)束時記錄AMS評分。將受試者6 h急性低氧暴露結(jié)束時AMS評分≥3者定為AMS。Phase 2：恢復(fù)1周后，受試者進行3周(2 h/d, 4 d/周)IAE輔以運動，模擬海拔高度分別為2 500 m(1周)、3 500 m (1周)和4 800 m(1周)?？刂七\動強度，使受試者在上述低氧環(huán)境下運動時的SPO2分別處于90%～92%、＜88%和＜75%水平，運動形式跑步、蹬車可選?；謴?fù)1周，重復(fù)Phase1，LLS量表評價AMS，具體流程見圖1。

圖1 實驗流程示意圖1.2.2 基因多態(tài)分析 采用promega公司試劑盒提取基因組DNA。解析C-664G及T2238C位點基因型，方法參照華中科技大學(xué)張利蕓方法［11］。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）描述組內(nèi)的AMS評分水平；基因型及等位基因頻率差異用Mantel-Hanensze χ2檢驗，應(yīng)用SPSS 16.0軟件包完成統(tǒng)計分析，統(tǒng)計學(xué)顯著性水平定為0.05，非常顯著性水平定為0.01。

2 結(jié) 果

所有受試者的年齡、身高、體重、身體狀況、來源地等差異均無顯著性(P＞0.05)。Phase 1中，受試者的AMS評分值為2.7±2.1，發(fā)生與未發(fā)生AMS的受試者AMS評分分別為4.3±1.7和1.1±0.9。受試者49.2%(30/61)發(fā)生AMS，評分值區(qū)間為0～10。受試者C-664A及T2238C位點的基因型分布均符合HardyWeinberg平衡(p＜0.05)，不同基因型和等位基因攜帶者的AMS發(fā)生比率見表1。在C-664G位點，CC和CG基因型攜帶者的AMS評分分別為2.7±2.1和2.8±1.3，在T2238C位點，TT、TC和CC基因型攜帶者的AMS評分分別為2.7±2.2、2.2±1.7和4.5±0.7，兩個位點不同基因型和等位基因攜帶者的AMS發(fā)生率均無顯著差異。

表1 C-664G和T2238C位點不同基因型和等位基因

攜帶者AMS的發(fā)生比率

組別AMS評分＜3AMS評分≥3χ2PC-664G位點CC(n,%)30 (52.6)27 (47.4)1.14＞0.05CG(n,%)1 (25.0)3 (75.0)C(n,%)61 (52.3)57 (47.7)1.10＞0.05G(n,%)1 (25.0)3 (75.0)T2238C位點TT(n,%)24(49.0)25(51.0)3.60＞0.05TC(n,%)7(70.0)3(30.0)CC(n,%)0(10.0)2(100.0)T(n,%)55(50.9)53(49.1)0.00＞0.05C(n,%)7(50.0)7(50.0) 受試者低氧運動前后的AMS評分分布參見表2。低氧運動后，受試者的AMS評分為1.4±1.6，發(fā)生與未發(fā)生AMS的受試者AMS評分分別為4.0±1.2和0.8±0.8，受試者81.3% (39/48)發(fā)生AMS，評分值區(qū)間為06，評分分布頻率在低氧運動前、后差異非常顯著（χ2=10.83, df=1, P＜0.01）。低氧運動后，受試者的AMS評分60.4% (29/48)下降，27.1% (13/48)不變，12.5%(6/48)上升。C-664G和T2238C位點不同基因型和等位基因攜帶者AMS評分變化分布見表3：低氧運動后，在C-664G位點，基因型CC和CG攜帶者的AMS評分分別為1.3±1.6和2.0±0.0；在T2238C位點，基因型TT、TC和CC攜帶者的AMS評分分別為1.4±1.6、1.2±1.3和2.5±2.1，兩個位點不同基因型和等位基因攜帶者的AMS評分變化趨勢間無顯著差異。

表2 受試者運動訓(xùn)練前后AMS評分分布

組別＜3（例，%）≥3（例，%）χ2P運動訓(xùn)練前31 (50.8)30 (49.2)10.83 ＜0.01運動訓(xùn)練后39 (81.3)9 (18.7)

3 討論與分析

AMS的發(fā)生與運動量有關(guān)［12］。有人研究了低氧下運動對AMS的發(fā)生、程度及SPO2的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，受試者在運動時比在靜息時，無論AMS發(fā)生率還是其嚴(yán)重程度都較高［12］；當(dāng)受試者在海拔4 300 m環(huán)境中以60%～70% V•O2max強度進行運動時，其SPO2的下降水平與在5 000～5 500 m靜息時相似，表明在相同海拔高度下運動可造成受試者額外的低氧負(fù)擔(dān)［13］。鑒于上述原因，本研究采用模擬海拔4 800 m暴露6 h的低氧劑量，輔以30 min的恒定負(fù)荷運動，結(jié)果49.2%的受試者發(fā)生AMS，成功構(gòu)建了適于AMS研究的急性低氧暴露模型。

IAE在AMS習(xí)服中作用的定量研究僅見于2004年［4］。Beidleman等發(fā)現(xiàn)，模擬海拔4 300 m環(huán)境下3周IAE輔以運動可有效降低AMS的發(fā)生率和嚴(yán)重程度。本研究亦采用了3周IAE輔以運動的方案。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，低氧運動后，受試者的AMS評分由2.7±2.1降為1.4±1.6，受試者的AMS評分分布頻率差異非常顯著（χ2=10.83, df=1, P＜0.01），AMS發(fā)生率明顯降低（49.2%18.7%），60.4%的受試者評分下降，說明本方案對世居平原人適應(yīng)低氧環(huán)境、減輕AMS程度效果顯著。我們注意到研究中受試者表現(xiàn)出明顯的個體差異，低氧運動后27.1%的受試者AMS評分不變，12.5%評分上升，表明本方備的個體局限性，而基因多態(tài)研究有望成為突破口。

表3 C-664G和T2238C位點不同基因型和等位基因

攜帶者AMS評分變化分布

組別AMS評分下降A(chǔ)MS評分不變AMS評分上升χ2PC-664G位點CC(n,%)27(60.0)13 (28.9)5 (11.1)2.00＞0.05CG(n,%)2(66.7)0(0.0)1(33.3)C(n,%)57(60.6)26 (27.7)11 (11.7)1.95＞0.05G(n,%)2(66.7)0(0.0)1(33.3)T2238C位點TT(n,%)24 (60.0)10 (25.0)6 (15.0)1.59＞0.05TC+CC(n,%)5 (62.5)3 (37.5)0 (0.0)T(n,%)26(60.5)11 (25.6)6(14.0)1.04＞0.05C(n,%)3(60.0)2(40.0)0(0.0) ANP是低氧反應(yīng)基因，但AMS與ANP的關(guān)聯(lián)研究結(jié)果不一［1］：Bαrtsch等和Cosby等發(fā)現(xiàn)AMS和高原肺水腫患者的ANP含量高于健康人；Milledge等發(fā)現(xiàn)較高水平ANP與較高AMS耐受性有關(guān)；Loeppky等則發(fā)現(xiàn)ANP與AMS的發(fā)生無關(guān)。目前已知與AMS易感性有關(guān)的基因包括ACE、eNOS、ET-1等，涉及多態(tài)位點20余個［1］，但尚無ANP基因多態(tài)性與AMS易感性的關(guān)聯(lián)研究。近年來，研究發(fā)現(xiàn)C-664G和T2238C位點多態(tài)會影響ANP的功能，并在冠心病、高血壓易感性等研究中得到印證［14,15］。具體到本研究，基因型CC和CG在所有受試者中的比率為93.4%和6.6%，等位基因C和G的比率為96.7%和3.3%，與Zhang等［11］報道的結(jié)果相似；基因型TT、TC和CC在所有受試者中的比率為80.3%、16.4%和3.3%，等位基因T和C的比率為88.5%和11.5%，與楊麗姝等［16］的結(jié)果相似，但與Zhang等［11］和Kato等［15］的結(jié)果不同。因Zhang和Kato的研究對象分別來自武漢和日本，與本研究及楊麗姝研究的北方漢族人存在地域和種族差異，從而導(dǎo)致結(jié)果的不同。

本研究首次對C-664G和T2238C位點多態(tài)性與AMS發(fā)生及其低氧習(xí)服的關(guān)系進行了探索。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在C-664G和T2238C位點，不同基因型和等位基因攜帶者的AMS發(fā)生率無顯著差異，不同基因型攜帶者的AMS評分在低氧運動前后的變化趨勢也不顯著(χ2=0.78, df=1, P＞0.05; χ2=0.03, df=2, P＞0.05)，說明這兩個位點對AMS的發(fā)生和低氧習(xí)服無影響。雖然研究中發(fā)現(xiàn)某些基因型攜帶者的AMS發(fā)生率高達75.0% (CG)和100.0% (CC)，但由于CG和CC基因型分布頻率僅為4.9%和3.3%，故無法作為AMS易感性的遺傳學(xué)標(biāo)記。事實上，如前面所述，C-664G及T2238C各基因型在不同種族內(nèi)分布差異巨大［11,17］，即使在相同種族內(nèi)，我國不同地區(qū)人群中其分布也大相徑庭［11,14］。鑒于當(dāng)前AMS的研究對象多為真實高原條件下的AMS患者，數(shù)量有限；通過模擬低氧環(huán)境建立AMS患病模型的過程中，設(shè)備、場地等條件的限制又制約了研究的規(guī)模。此外，本研究對象僅限于年輕男性，不同年齡和性別間的差異未涉及，故尋找適合不同年齡和性別的運動方案、進一步加大樣本含量、 優(yōu)化基因位點的選擇是我們未來研究的方向。

4 結(jié) 論

IAE輔以運動對AMS低氧習(xí)服效果明顯，可顯著提高個體的低氧耐受能力，可應(yīng)用于世居平原北方漢族男性初次進入高原前，預(yù)防AMS的發(fā)生，減輕其嚴(yán)重程度；ANP基因的C-664G和T2238C位點多態(tài)性與AMS的發(fā)生及低氧習(xí)服效果無關(guān)。

參考文獻：

［1］ 周文婷，胡揚.內(nèi)分泌、遺傳及運動――急性高原病發(fā)病機理、預(yù)測、診斷和干預(yù)［J］.北京體育大學(xué)學(xué)報, 2008,31(10):1342-1345.

［2］ Moore LG, Harrison GL, McCullough RE, et al. Low acute hypoxic ventilatory response and hypoxic depression in acute altitude sickness［J］.J Appl Physiol,1986, 60: 1407-1412.

［3］ Purkayastha SS, Ray US, Arora BS, et al. Acclimatization at high altitude in gradual and acute induction［J］.J Appl Physiol,1995,79:487-492.

［4］ Beidleman BA, Muza SR, Fulco CS, et al. Intermittent altitude exposures reduce acute mountain sickness at 4300m［J］.Clin Sci (Lond),2004,106(3):321-328.

［5］ 鄭然.急性高原病易感人群預(yù)測模型、方法研究［D］.重慶:第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文，2005，188.

［6］ Winter RJD, Meleagros L, Pervez S, et al. Atrial natriuretic peptide levels in plasma and in cardiac tissues following chronic hypoxia in rats［J］.Clin Sci,1989,76:95-101.

［7］ Milledge JS, Beeley JM, McArthur S, et al. Atrial natriuretic peptide, altitude and acute mountain sickness［J］.Clin Sci (Lond),1989,77(5):509-514.

［8］ Loeppky JA, Icenogle MV, Maes D, et al. Early fluid retention and severe acute mountain sickness［J］.J Appl Physiol,2005, 98(2): 591-597.

［9］ Milledge JS. Altitude medicine and physiology including heat and cold: A review［J］.Travel Med Infect Dis,2006, 4(3-4): 223-37.

［10］ Honigman B, Thesis MK and Koziol-McLain J. Acute mountain sickness in a general tourist population at moderate altitude［J］.Ann Intern Med,1993,118:587-592.

［11］ Zhang L, Cheng L, He M, et al. ANP T2238C, C-664G gene polymorphism and coronary heart diseasein chinese population［J］.J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci，2006,26(5):528-530.

［12］ Roach RC, Maes D, Sandoval D, et al. Exercise exacerbates acute mountain sickness at simulated high altitude［J］.J Appl Physiol,2000,88(2):581-585.

［13］ Beidleman BA, Rock PB, Muza SR, et al. Exercise Ve and physical performance are not affected by menstrual cycle phase at altitude［J］.J Appl Physiol,1999,86:1519-1526.

［14］ 李南方，張艷敏，李濤，等.新疆哈薩克族原發(fā)性高血壓與心鈉素基因T2238C多態(tài)性的關(guān)系［J］.臨床心血管病雜志,2005,21(9):513-515.

［15］ Kato N, Sugiyama T, Morita H et al. Genetic analysis of the atrial natriuretic peptide gene in essential hypertension［J］.Clin Sci, 2000, 98: 251-258.