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審判人員對單一證據(jù)可以從下列方面進(jìn)行審核認(rèn)定:
①證據(jù)是否原件、原物 復(fù)印件、復(fù)制品與原件、原物是否相符;②證據(jù)與本案事實(shí)是否相關(guān); ③證據(jù)的形式、來源是否符合法律規(guī)定;④證據(jù)的內(nèi)容是否真實(shí);⑤證人或者提供證據(jù)的人與當(dāng)事人有無利害關(guān)系。認(rèn)定證人證言,可以通過對證人的智力狀況、品德、知識、經(jīng)驗(yàn)、法律意識和專業(yè)技能等的綜合分析作出判斷。
審判人員對案件的全部證據(jù),應(yīng)當(dāng)從各證據(jù)與案件事實(shí)的關(guān)聯(lián)程度、各證據(jù)之間的聯(lián)系等方面進(jìn)行綜合審查判斷。
2、以下證據(jù),應(yīng)確定其證明力。
⑴一方當(dāng)事人提出的下列證據(jù),對方當(dāng)事人提出異議但沒有足以反駁的相反證據(jù)的,人民法院應(yīng)當(dāng)確認(rèn)其證明力:
①書證原件或者與書證原件核對無誤的復(fù)印件、照片、副本、節(jié)錄本;②物證原物或者與物證原物核對無誤的復(fù)制件、照片、錄像資料等;③有其他證據(jù)佐證并以合法手段取得的、無疑點(diǎn)的視聽資料或者與視聽資料核對無誤的復(fù)制件;④一方當(dāng)事人申請人民法院依照法定程序制作的對物證或者現(xiàn)場的勘驗(yàn)筆錄。
⑵人民法院委托鑒定部門作出的鑒定結(jié)論,當(dāng)事人沒有足以反駁的相反證據(jù)和理由的,可以認(rèn)定其證明力。
⑶一方當(dāng)事人提出的證據(jù),另一方當(dāng)事人認(rèn)可或者提出的相反證據(jù)不足以反駁的,人民法院可以確認(rèn)其證明力。 一方當(dāng)事人提出的證據(jù),另一方當(dāng)事人有異議并提出反駁證據(jù),對方當(dāng)事人對反駁證據(jù)認(rèn)可的,可以確認(rèn)反駁證據(jù)的證明力。
⑷當(dāng)事人對自己的主張,只有本人陳述而不能提出其他相關(guān)證據(jù)的,其主張不予支持。但對方當(dāng)事人認(rèn)可的除外。
⑸訴訟過程中,當(dāng)事人在起訴狀、答辯狀、陳述及其委托人的詞中承認(rèn)的對己方不利的事實(shí)和認(rèn)可的證據(jù),人民法院應(yīng)當(dāng)予以確認(rèn),但當(dāng)事人反悔并有相反證據(jù)足以推翻的除外。
⑹有證據(jù)證明一方當(dāng)事人持有證據(jù)無正當(dāng)理由拒不提供,如果對方當(dāng)事人主張?jiān)撟C據(jù)的內(nèi)容不利于證據(jù)持有人,可以推定該主張成立。當(dāng)事人對自己的主張,只有本人陳述而不能提供出其他相關(guān)證據(jù)的,其主張不予支持,但對方當(dāng)事人認(rèn)可的除外。
3、以下證據(jù)不能單獨(dú)作為認(rèn)定案件事實(shí)的依據(jù):
①未成年人所作的與其年齡和智力不相當(dāng)?shù)淖C言;②與一方當(dāng)事人或者其人有利害關(guān)系的證人出具的證言;③存有疑點(diǎn)的視聽資料;④無法與原件、原物核對的復(fù)印件、復(fù)制品;⑤無正當(dāng)理由未出庭作證的證人證言。
4、以下證據(jù),不確定其證明力。
摘 要 宿州市橋區(qū)男女顧客在健身目的、對配套設(shè)施滿意度、對經(jīng)營管理及服務(wù)滿意度、對健身項(xiàng)目滿意度上有顯著差異。女顧客因?yàn)榫徑夤ぷ鲏毫Χ∩淼娜藬?shù)比例遠(yuǎn)高于男顧客,男顧客因?yàn)檎莆战∩砑记啥∩淼娜藬?shù)比例遠(yuǎn)高于女顧客;男顧客對于配套設(shè)施的滿意度比女顧客明顯偏低,女顧客對于經(jīng)營管理及服務(wù)滿意度,對健身項(xiàng)目滿意度比男顧客明顯偏低。顧客對健身器材和價(jià)格普遍滿意度較低;對于安全問題的注意程度極高。
關(guān)鍵詞 健身俱樂部 顧客 滿意度
目前健身在世界上日益流行。筆者試圖通過對宿州市橋區(qū)健身俱樂部現(xiàn)狀及顧客滿意度進(jìn)行調(diào)查研究,對278份有效的宿州市橋區(qū)健身俱樂部顧客基本情況調(diào)查表進(jìn)行整理分析,探討目前宿州市橋區(qū)健身俱樂部的不足,并分析原因及提出相應(yīng)的意見和建議,以期為推動宿州市橋區(qū)健身俱樂部的發(fā)展提供一定的參考。
一、宿州市橋區(qū)健身俱樂部顧客基本情況
當(dāng)前宿州市橋區(qū)女顧客健身人數(shù)比例多于男顧客,可見當(dāng)今社會,女顧客對于健身重視程度與參與比例更高,各健身俱樂部應(yīng)當(dāng)更多注意女顧客的健身需求,從而得到更多的顧客的滿意。
在健身俱樂部消費(fèi)的顧客主要為月收入在4500元以上的人群,低收入人群在健身房健身的比例極少。
有40.2%的男顧客最偏向于為了鍛煉身體去健身,占第一位;31.1%的男顧客為了塑造體型,占第二位。女顧客更多的因?yàn)樗茉祗w型去健身;男顧客在為了緩解工作壓力去健身的比例僅為8.2%,遠(yuǎn)小于女顧客的17.3%;而女顧客為了掌握健身技巧去鍛煉的人數(shù)比例僅為3.8%,男顧客在這一數(shù)據(jù)上則為10.7%。
二、宿州市橋區(qū)健身俱樂部顧客滿意度的現(xiàn)狀分析
(一)對健身環(huán)境的滿意度
健身環(huán)境是健身俱樂部一項(xiàng)重要的組成部分,會員對健身環(huán)境的滿意與否,直接關(guān)系到會員對整個(gè)健身消費(fèi)的滿意與否,進(jìn)而直接關(guān)系到顧客對健身的興趣,可以在一定程度上反映顧客對健身的需求。目前宿州市橋區(qū)健身俱樂部顧客對健身空間滿意度較高,男女顧客滿意的比例均在55%以上。僅有的對健身空間不滿意的幾名顧客均在面積小于1000平米的俱樂部??梢姰?dāng)建筑面積大于1000平米時(shí),顧客對健身房健身空間滿意度極高。對健身房配套設(shè)施的態(tài)度上男顧客的滿意度要低于女顧客。在對顧客調(diào)查表的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)后發(fā)現(xiàn)男顧客對健身俱樂部的建議主要為提供專業(yè)的放松按摩與保健。女顧客對健身俱樂部的建議多為提供免費(fèi)的營養(yǎng)品。
(二)對健身器材的滿意度
健身器材是健身俱樂部硬件設(shè)施的重要組成部分,顧客對于健身俱樂部健身器材的滿意度是顧客對健身滿意程度的重要組成部分。
宿州市橋區(qū)健身俱樂部的顧客對其健身器材的滿意度一般。男顧客對健身器材滿意與基本滿意的人數(shù)比例總共為53.3%,女顧客則為57.7%。多數(shù)人認(rèn)為健身俱樂部應(yīng)當(dāng)增加健身器材種類、增加熱門器材數(shù)目和增強(qiáng)器材安全性。
(三)對管理及服務(wù)的滿意度
目前宿州市橋區(qū)健身俱樂部女顧客對俱樂部經(jīng)營管理及服務(wù)滿意度明顯較低,不滿意顧客的建議主要為提高工作人員服務(wù)態(tài)度的人數(shù)最多。
目前宿州市橋區(qū)健身俱樂部顧客對教練員滿意度較高。
目前宿州市橋區(qū)健身俱樂部女顧客對健身項(xiàng)目的滿意度低于男顧客,女顧客對健身項(xiàng)目滿意及比較滿意的人數(shù)比例之和為67.3%,男顧客為86.9%。建議主要涉及增加熱門項(xiàng)目的課時(shí)數(shù)、增添免費(fèi)項(xiàng)目、增加項(xiàng)目種類、增加免費(fèi)課時(shí)數(shù)、提升免費(fèi)課時(shí)教練水平,提升免費(fèi)課時(shí)連續(xù)性等。
(四)對價(jià)格的滿意度
目前宿州市橋區(qū)健身俱樂部顧客對健身俱樂部價(jià)格滿意度不高,男女顧客普遍反映健身俱樂部收費(fèi)過高,會員費(fèi)用、私教費(fèi)用均有人反映,還有部分顧客反映辦理過健身俱樂部會員后還有部分器材要額外收費(fèi),其中以女顧客居多。
目前宿州市橋區(qū)健身俱樂部男女顧客在對保險(xiǎn)費(fèi)用的態(tài)度和安全問題的注意程度上沒有顯著差異。宿州市橋區(qū)健身俱樂部顧客對健身安全和保險(xiǎn)問題的關(guān)注度極高,大多數(shù)顧客對在會費(fèi)中加入保險(xiǎn)費(fèi)用持贊成態(tài)度。
三、結(jié)論與建議
(一)結(jié)論
1.宿州市橋區(qū)男女顧客在健身目的、對配套設(shè)施滿意度、對經(jīng)營管理及服務(wù)滿意度、對健身項(xiàng)目滿意度上有顯著差異。
2.女顧客因?yàn)榫徑夤ぷ鲏毫Χ∩淼娜藬?shù)比例遠(yuǎn)高于男顧客,男顧客因?yàn)檎莆战∩砑记啥∩淼娜藬?shù)比例遠(yuǎn)高于女顧客;男顧客隊(duì)友配套設(shè)施的滿意度比女顧客明顯偏低,女顧客對于經(jīng)營管理及服務(wù)滿意度、對健身項(xiàng)目滿意度比男顧客明顯偏低。
3.顧客對健身器材和價(jià)格普遍滿意度較低;對于安全問題的注意程度極高。
(二)建議
1.目前宿州市橋區(qū)健身俱樂部應(yīng)當(dāng)為女顧客更多的設(shè)計(jì)減壓項(xiàng)目,為男顧客更多的設(shè)置健身技巧的學(xué)習(xí)項(xiàng)目,但不能放松對顧客就鍛煉身體及塑造體形要求的重視。
2.注重提高男顧客對配套設(shè)施的滿意度,措施主要為提供專業(yè)的放松按摩與保健、免費(fèi)鐘點(diǎn)房和運(yùn)動飲料。
3.注重提高女顧客對于經(jīng)營管理及服務(wù)的滿意度,措施主要為提高工作人員服務(wù)態(tài)度;提高女顧客對健身項(xiàng)目的滿意度,措施主要為增加熱門項(xiàng)目的課時(shí)數(shù)、免費(fèi)項(xiàng)目、項(xiàng)目種類、免費(fèi)課時(shí)數(shù)、提升免費(fèi)課的教練水平和連續(xù)性。
4.注重提高顧客對健身器材的總體滿意度,措施主要為增加健身器材種類和熱門器材數(shù)目;提高顧客對價(jià)格的普遍滿意度,措施主要為適度降低價(jià)格和減免額外收費(fèi)。
參考文獻(xiàn):
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[關(guān)鍵詞] 林可霉素;免疫功能;巨噬細(xì)胞
[中圖分類號] R97 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A[文章編號]1674-4721(2011)02(c)-009-03
The effect of lincomycin on the immune function of human peripheral blood-derived mononuclear macrophage cells in vitro
LI Feng1, LIU Hongjie2*
(1.The 95857 Military Hospital, Xiaogan City, Hubei Province, Xiaogan 432100, China; 2.Department of Gastrointestinal Surgery, the First People's Hospital, Guangzhou City, Guangdong Province, Guangzhou 510510, China)
[Abstract] Objective: To investigate the effect of lincomycin on the surface molecules expression level of human peripheral blood-derived mononuclear macrophage cells in vitro. Methods: Macrophage cells were extracted in vitro from peripheral blood of health volunteers and incubated with lincomycin for 48 h, the variation of CD80, MHCⅡ and Fas were detected with flow cytometric analysis, and the secretion of IFN-γ and TNF-α by macrophage cells were detected with ELISA. Results: The lincomycin decreased the expression of antigen-presenting factor CD80, MHCⅡ of macrophage cells and their production of IFN-γ, TNF-α, and increased the Fas expression on the cells. Conclusion: Lincomycin inhibits immune function of the macrophage cells, and induces their death.
[Key words] Lincomycin; Immune function; Macrophage
林可霉素是一種臨床常用藥,對G+菌及部分厭氧菌有明顯殺菌作用,然而,目前發(fā)現(xiàn)其對機(jī)體整體免疫功能有明顯的抑制作用[1]。本研究針對免疫系統(tǒng)中起關(guān)鍵作用的單核巨噬細(xì)胞進(jìn)行研究,從健康人外周血培養(yǎng)骨髓DC,經(jīng)林可霉素刺激48 h,探討其對小鼠DC的表面共刺激分子以及免疫功能的影響。
1 材料與方法
1.1 材料及主要試劑
健康人外周血來自于20~25歲健康志愿者;人重組M-CSF購自Peprotech,PE標(biāo)記的鼠抗人MHCⅡ(HLA-DR)抗體(同型對照為PE標(biāo)記小鼠IgG2a),PE-鼠抗人CD80(同型對照為PE標(biāo)記小鼠IgG2b),人干擾素-γ(IFN-γ),腫瘤壞死因子α(TNF-α)細(xì)胞因子,ELISA檢測試劑盒均購自美國ebioscience公司;PE標(biāo)記鼠抗人Fas(同型對照為PE標(biāo)記小鼠IgG1)購自美國Biolegend公司;完全培養(yǎng)基RPMI1640購自美國hyclone公司;胎牛血清購自Gibco公司。
1.2 方法
1.2.1 人外周血單核巨噬細(xì)胞培養(yǎng)參照文獻(xiàn)方法[2],應(yīng)用淋巴細(xì)胞分離液分離健康人外周血,Tris-NH4CL破紅,RPMI1640洗2次,以含10%FCS、20 ng/ml mGM-CSF RPMI1640完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,以106細(xì)胞/孔加入六孔板培養(yǎng)。置于37℃、5% CO2孵育箱中,培養(yǎng)3 d后輕輕吸取培養(yǎng)基和上層懸浮細(xì)胞。隔日半量換液至第7天。
1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組及細(xì)胞處理將培養(yǎng)第7天的細(xì)胞分為兩組,①對照組:培養(yǎng)液加0.9%氯化鈉溶液;②林可霉素處理組:培養(yǎng)液加林可霉素5 μg/ml。孵育48 h后保留細(xì)胞懸液。
1.2.3 單核巨噬細(xì)胞表型改變收集細(xì)胞調(diào)整密度為1×106/ml,加入PE標(biāo)記鼠抗人CD80(同型對照為PE標(biāo)記小鼠IgG2b),PE標(biāo)記鼠抗人Fas(同型對照為PE標(biāo)記小鼠IgG1),PE標(biāo)記的鼠抗人MHCⅡ(HLA-DR)類分子(同型對照為PE標(biāo)記小鼠IgG2a)各5 μl,室溫避光反應(yīng)30 min,PBS洗3次,最終定容于500 μl,流式細(xì)胞儀檢測。
1.2.4 細(xì)胞因子的檢測按照 ELISA試劑盒說明檢測細(xì)胞培養(yǎng)液上清的IFN-γ、TNF-α水平。以加0.9%氯化鈉溶液的細(xì)胞懸液為對照組。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
全部統(tǒng)計(jì)采用SPSS 11.5軟件進(jìn)行,組間比較采用單因素方差分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 單核巨噬細(xì)胞鑒定
收集對照組和處理組的細(xì)胞懸液,用流式細(xì)胞儀檢測其表面單核巨噬細(xì)胞特異性標(biāo)志CD14,經(jīng)分析CD14陽性細(xì)胞占90%,證實(shí)單核巨噬細(xì)胞培養(yǎng)成功。見圖1。
2.2 抗原提呈相關(guān)分子MHCⅡ、CD80表達(dá)改變
應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測單核巨噬細(xì)胞表面與抗原呈遞相關(guān)分子MHCⅡ類分子及CD80分子,結(jié)果顯示,與對照組相比,林可霉素處理組的CD80、MHCⅡ表達(dá)明顯降低(P<0.05)。見圖2、3。
2.3 單核巨噬細(xì)胞分泌細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α檢測
經(jīng)過48 h作用后,林可霉素處理組的單核巨噬細(xì)胞分泌IFN-γ、TNF-α水平均顯著降低(P<0.05)。見圖4。
2.4 單核巨噬細(xì)胞表面凋亡受體Fas表達(dá)檢測
通過對流式細(xì)胞術(shù)檢測單核巨噬細(xì)胞表面Fas受體的表達(dá)發(fā)現(xiàn),林可霉素處理組表面凋亡受體表達(dá)顯著升高(P<0.01)。見圖5。
3 討論
林可霉素是臨床抗感染常用藥品,具有廣譜抗革蘭陽性菌的作用,然而,林可霉素應(yīng)用過程中出現(xiàn)了明顯的免疫功能抑制現(xiàn)象,明顯限制了機(jī)體對外來病原微生物的產(chǎn)生的自身免疫應(yīng)答。本研究通過對重要的免疫細(xì)胞樹突狀細(xì)胞的研究,從免疫應(yīng)答的起始階段來討論林可霉素的作用。
單核巨噬細(xì)胞是體內(nèi)重要的免疫細(xì)胞,它不僅是天然免疫系統(tǒng)的重要細(xì)胞,發(fā)揮著病原微生物入侵機(jī)體后前期直接殺滅病原微生物的作用,而且還可通過抗原提呈作用,激活后續(xù)病原微生物特異性T 淋巴細(xì)胞,導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生針對病原微生物的特異性免疫應(yīng)答,協(xié)助機(jī)體免疫系統(tǒng)清除病原微生物。
在本研究中發(fā)現(xiàn),單核巨噬細(xì)胞表面分子MHC-Ⅱ類分子、CD80分子明顯降低。MHC-Ⅱ類分子是T細(xì)胞活化的第一信號關(guān)鍵分子,CD80分子是單核巨噬細(xì)胞表面共刺激分子,兩者共同為單核巨噬細(xì)胞激活特異性T細(xì)胞發(fā)揮重要作用[3-4]。林可霉素作用后,單核巨噬細(xì)胞表面MHC-Ⅱ類分子、CD80分子表達(dá)明顯降低,證實(shí)其誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞活化的能力顯著減弱。
作為免疫細(xì)胞,單核巨噬細(xì)胞除了直接激活病原微生物特異T細(xì)胞外,還可分泌細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α,促進(jìn)特異性T細(xì)胞的活化、增殖及最終的殺傷作用[5]。經(jīng)過林可霉素作用后,單核巨噬細(xì)胞分泌IFN-γ及TNF-α的作用明顯減弱,從而導(dǎo)致殺傷性T淋巴細(xì)胞對病原微生物的清除能力明顯減弱。
另外,F(xiàn)as是一種能誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的細(xì)胞膜死亡信號受體,與其配體(FasL)結(jié)合后會向細(xì)胞內(nèi)傳遞死亡信號,導(dǎo)致細(xì)胞在短時(shí)間內(nèi)發(fā)生死亡[6]。目前研究發(fā)現(xiàn),在腫瘤、感染及其他因素的影響下,單核巨噬細(xì)胞可誘導(dǎo)性地表達(dá)Fas,與機(jī)體中的FasL結(jié)合,導(dǎo)致單核巨噬細(xì)胞死亡。在本研究中,林可霉素誘導(dǎo)了單核巨噬細(xì)胞高表達(dá)Fas,使單核巨噬細(xì)胞更易于凋亡,從而抑制了機(jī)體的免疫功能。
綜上所述,本研究以單核巨噬細(xì)胞為切入點(diǎn),證實(shí)林可霉素可以明顯地抑制單核巨噬細(xì)胞免疫功能,并誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡,從而有利于進(jìn)一步指導(dǎo)臨床用藥。
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在車到景點(diǎn)之前,我先為大家介紹蘇州園林的基本情況?!吧嫌刑焯?,下有蘇杭?!碧K州為典型的江南水鄉(xiāng)城市,素有“東方威尼斯”之美譽(yù)。當(dāng)然,也請大家注意環(huán)境衛(wèi)生,做一個(gè)文明游客。
我們馬上到了今日黃金游的第一站——留園。好,留園到了。留園位于蘇州市園林路。它應(yīng)用了分合,明暗等對比手法。大家好好觀賞吧!
留園不留我們,那我們就去獅子林吧!獅子林到了,你們跟我來,獅子林變幻莫測,值得一覽。
穿過獅子林,出去約5千米,可見寒山寺,要不現(xiàn)在大家休息一會兒吧。說到寒山寺,大家自然會想起“姑蘇城外寒山寺,夜半鐘聲到客船”的詩句吧!因唐初有個(gè)叫寒山的和尚未在這里住過而得名?,F(xiàn)在寺內(nèi)存碑一方,上刻張繼寫的《楓橋夜泊》一詩。
“蟬噪林愈靜,鳥鳴山更幽”,這是王籍的兩句名詩。詩人以“噪”襯“靜”,益顯其靜;用“鳴”襯“幽”,愈見其幽,這兩句詩把靜景寫活了。王安石看了卻認(rèn)為大謬不然,于是揮毫將它改成“一蟬不噪林愈靜,一鳥不鳴山更幽”。王安石用孤立的、靜止的觀點(diǎn)去看待客觀事物,把詩句改得韻味全無,無怪乎黃庭堅(jiān)譏笑他是“點(diǎn)金成鐵”。
相傳,古時(shí)蘇州有個(gè)秀才,善詩工文。一天晚上,皓月當(dāng)空,秀才觸景生情,即興作了一首詠月詩。適逢太守來訪,秀才請他修改。當(dāng)太守看到“一輪明月照蘇州”一句時(shí),便說:“偌大的月亮,如何只照蘇州,不照別處?”于是便在“蘇州”后面添上了“無錫等地”四個(gè)字,變成為“一輪明月照蘇州無錫等地”。這位太守根本不知詩為何物,無知妄說,弄得秀才啼笑皆非。此事傳出去,聞知者無不大笑。
蘇軾寫的《古史》,即對《史記》所作的修改,有不少是因?yàn)槠埡喍櫞耸П说臄」P。例如《史記·樗里子甘茂列傳》寫道:“母,韓女也。樗里子滑稽多智?!薄豆攀贰穮s說:“母,韓女也,滑稽多智?!眲h去三字,語意不明。再如:“甘茂者,下蔡人也,事下蔡史,舉,學(xué)百家之說?!薄豆攀贰肥∪釉~“事”,就與原意迥然不同。